詳細介紹
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
RK-33 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
RK-33是RNA helicase的抑制劑,可抑制DDX3的活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1070773-09-9 純度:97.11% 分子量:428.44 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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RRAD抗體*草菇L238人甲狀腺癌細胞TTA1(干細胞庫保藏)
環指蛋白128抗體#雙孢蘑菇人甲狀腺癌細胞KMH-2(干細胞庫保藏)
受體活性修飾蛋白1抗體#茶薪菇小鼠肥大細胞瘤細胞(干細胞庫保藏)
RNA helicase抑制劑(RK-33)雌二
其他 β-雌二;雌甾二;雌甾-1,3,5-(10)-三烯-3β,17β-二;β-1,3,5(10)-三烯-3,17β-二;3,17β-二羥基-1,3,5(10)-雌甾三烯-3,17β-二;β-雌
英文名稱: Estradiol
其他英文名稱: 1,3,5-Estratriene-3,17beta-diol;17beta-Estradiol;3,17beta-Dihydroxy-1,3,5(10)-estratriene;Dihydrofolliculin
產品規格: BR,98%
包 裝: 1克/5克/25克
CAS號:50-28-2
C18H24O2=272.38
級別:BR
含量:≥98.0%
熔點:173~179℃
比旋光度:+76~+83°(C=2, 5mol/L HCl)
水分:≤3.5%(KARL FISCHER)
性狀:粉末;無臭。本品在二氧六環、中溶解,在乙中略溶,在水中不溶。比旋度取本品,精密稱定,加二氧六環溶解并定量稀釋制成每1ml中含10mg的溶液,依法測定。
用途:生化研究。
保存:RT