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ELISA酶標儀的檢測單位和檢測值計算
閱讀：321 發布時間：2024-12-17ELISA酶聯免疫吸附試驗方法簡稱酶標法，是標記技術中的一種，是從熒光抗體技術，同位素免疫技術發展而來的一種敏感，特異，快速并且能自動化的現代技術。
酶標法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯劑結合為酶標抗原或抗體，此酶標抗原或抗體可與固相載體上或組織內相應抗原或抗體發生特異反應，并牢固地結合形成仍保持活性的免疫復合物。當加入相應底物時，底物被酶催化而呈現出相應反應顏色。顏色深淺與相應抗原或抗體含量成正比。
由于此技術是建立在抗原-抗體反應和酶的高效催化作用的基礎上，因此，具有高度的靈敏性和特異性，是一種極富生命力的免疫學試驗技術。
光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。
檢測單位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD=log（1/trans），其中trans為檢測物的透光值。根據Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關系：
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度， Ιo 為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算：
c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子。
在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長，在此波長下，此物質能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。
但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉換成二進位數字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%，沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中，檢測物的透光值均在 0%一100%之間。
透光值的計算如下：
T=（Meas—Min）/（Max—Min）
其中T為透光值， Meas為檢測的二進位數值， Min為在 0%的情況下檢測的二進位數值， Max為在100%的情況下檢測的二進位數值，舉例如下：
MaX=3600
Min=20
Meas=30
T=（30-20）/3600-20)=0．0028
OD=log（1/T）=log（1/0.0028）=2.552