化工儀器網
技術文章
揭秘ELISA顯色淡原因及解決方案
閱讀：177 發布時間：2023-7-3ELISA（enzyme linked immunosorbent assay）也就是酶聯免疫吸附測定，是指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結合，進行免疫反應的定性和定量檢測方法。下面揭秘ELISA顯色淡的八大原因及解決方案。
原因一：試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高。
解決方案：盡量縮短運輸時間，夏季應放冰塊降溫。
原因二：試劑盒未充分平衡。
解決方案：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。
原因三：培養箱溫度不足37℃。
解決方案：注意培養箱溫度，放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定，非隔水式培養箱尤其應注意。
原因四：保溫時間不足。
解決方案：校正定時鐘準確定時。
原因五：洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加。
解決方案：按說明書要求保留洗滌時間，準確記住洗滌次數。
原因六：移液器吸液量不足，吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔。
解決方案：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊密，吸嘴內壁要清潔，一次性使用。
原因七：蒸餾水水質有問題。
解決方案：使用新鮮合格的蒸餾。
原因八：底物作用時間不足。
解決方案：準確定時。
顯色一定要控制時間，根據試劑盒說明操作即可。一般來說，顯色時間過短，結果偏低；顯色時間過長，空白增高或者非特異性顯色增加。我公司供應的ELISA試劑盒種屬有人、大鼠、小鼠、豬、雞、兔、猴、牛、植物……