詳細介紹
細胞名稱 小鼠肉瘤細胞;CCRFS-180培養
形態特性 淋巴母細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 S-180細胞建于1959年(Foleg,G,et al)。該細胞系保持了肉瘤的腫瘤原性,可用于腫瘤發生機理的體內外研究。在體外,廣泛用于腫瘤花療法的篩選試驗(Cancer chemotherapy screening test)。
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳
小鼠肉瘤細胞;CCRFS-180培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
小鼠肉瘤細胞;CCRFS-180培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-NPM (Thr95)/FITC 熒光素標記磷酸化核仁磷酸蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-HBeAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
CC趨化因子受體3抗體 Anti-CCR-3 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/Cy7 Cy7標記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
FNDC8 英文名稱: Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體 規格 0.2ml
Anti-HBeAg/FITC 熒光素標記小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
PL-A2 ELISA Kit 大鼠磷脂酶A2Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 熒光素標記磷酸化熱休克蛋白27抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FRA2/FOSL2 FRA2/FOSL2抗體 規格 0.1ml
BMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白6 96T
Neuronal thread protein AD7c-NTP 英文名稱: 神經絲蛋白抗體 0.2ml
ASB9 英文名稱: 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體 0.2ml
Anti-Phospho-HSP27 (Ser78)/FITC 熒光素標記磷酸化熱休克蛋白27抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Streptavidin/Gold 金標記鏈霉親和素(10nm/15nm) 0.5ml
LGI3 英文名稱: Lgi3蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh DKK1 抑癌蛋白DKK1抗體 規格 0.2ml
CETP(Mouse cholest erolester transfer protein)ELISA Kit 小鼠膽固醇酯轉移蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
芐青霉素檢測試劑盒 96孔/盒 動物組織/水產/蜂蜜/奶
Anti-CLEC-2/CLEC1B/FITC 熒光素標記C型凝集素結構域家族1成員B抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
小鼠肉瘤細胞;CCRFS-180培養CTX(Human Cyclophosphamide) ELISA Kit 人環磷酰胺Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Melan-A/MART-1/Melanoma HMB45 黑色素瘤相關抗原/黑色素-A抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh ITPR2 5-三磷酸肌醇受體2抗體 規格 0.2ml
BP(Human Bullous Pemphigoid) ELISA Kit 人大皰性類天皰瘡抗體 96T
PP4R3B 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白磷酸酶3B抗體 0.2ml
C22orf26 英文名稱: 22號染色體開放閱讀框26抗體 0.2ml
Anti-Melan-A/MART-1/Melanoma HMB45 黑色素瘤相關抗原/黑色素-A抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
小鼠肉瘤細胞;CCRFS-180培養懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。