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長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184培養

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更新時間:2018-05-08 14:37:52瀏覽次數:412

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產品簡介

長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184培養只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導。歡迎廣大科研用戶!

詳細介紹

細胞名稱  長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184培養
形態特性 成纖維細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞系來源于一雌性長白山豬胚胎的皮膚。2011年由中科院昆明細胞庫建立。

培養條件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1:

2傳代;3-4天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-FOXO3A/FITC 熒光素標記轉錄因子FOXO3A抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Anti-NK-2R/FITC 熒光素標記神經激肽A受體/K物質受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh BTBD7 BTB/POZ結構域蛋白7抗體 規格 0.2ml

NGF-R(p75NTR) 神經生長因子受體(抗原) 0.5mg

HCA25a 英文名稱: 肝癌相關抗原hca25a 0.2ml

Rhesus antibody Rh RMND1 減數分裂同源蛋白1抗體 規格 0.2ml

Anti-NK-2R/FITC 熒光素標記神經激肽A受體/K物質受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT 小鼠腎損傷分子1Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標記兔CD33L抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh DUSP26/MKP8 雙特異性蛋白磷酸酶26抗體(原活化蛋白激酶磷酸酶8) 規格 0.2ml

COX IgG VI 柯薩奇病毒 IgG Ⅵ(間接法二步法)

GPR24 英文名稱: G蛋白偶聯受體24抗體 0.1ml

ACY3 英文名稱: 丙型肝炎病毒核結合蛋白-1抗體 0.2ml

Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標記兔CD33L抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgM 0.1ml

D4 GDI 英文名稱: 轉移抑制基因GDIA2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ANKRD13B 錨蛋白重復結構域蛋白13B抗體 規格 0.2ml

Anti-IQGAP1/FITC 熒光素標記支架蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG F(ab')2 規格 0.1ml

Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光素標記SARS抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Beta-EP(human Beta-Endorphin) ELISA Kit 人β內啡肽Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-HB-EGF/DTSF 肝素結合性表皮生長因子抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mitofusin 2/MFN2 線粒體融合蛋白Mfn2抗體 規格 0.1ml

E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit 人泛素結合酶 96T

ROCK1 英文名稱: Rho相關蛋白激酶1抗體 0.1ml

CHD4 英文名稱: 染色質解旋酶DNA結合蛋白Mi2β抗體 0.1ml

Anti-HB-EGF/DTSF 肝素結合性表皮生長因子抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml

 

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