詳細介紹
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞;DH82價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 狗腎惡性組織細胞增生癥細胞;DH82價格
形態特性 巨噬細胞
品牌 貼壁生長
特征特性 DH82細胞具有類似巨噬細胞形態,并能吞噬乳膠顆粒。 細胞具有Fc gamma受體陽性,Fc mu和C3b受體陰性。 細胞不生成IL-1。
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-GDF-1/FITC 熒光素標記抗生長、分化因子1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-NRSF/REST/FITC 熒光素標記神經元抑制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BMPR2 骨形態發生蛋白2受體抗體 規格 0.1ml
GLUT4(Glucose transporter type 4) 葡萄糖轉運蛋白4(抗原) 0.5mg
HA tag 英文名稱: HA tag標簽抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh REF-1/APEX1 多功能DNA修復酶抗體 規格 0.1ml
Anti-NRSF/REST/FITC 熒光素標記神經元抑制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結合蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Anti-Adenylate Kinase 1/ AK1 腺苷酸激酶-1抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr276) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 規格 0.1ml
AP-Streptavidin稀釋液 10ml pH 7.6,高背景或AP存在時推薦使用
VAX2 英文名稱: 視神經視網膜相關蛋白VAX2抗體 0.2ml
phospho-DAXX (Ser671) 英文名稱: 磷酸化Fas相關死亡結構域蛋白抗體 0.1ml
Anti-Adenylate Kinase 1/ AK1 腺苷酸激酶-1抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GSTA3 英文名稱: 谷胱甘肽S轉移酶A3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD45/CT117 /抗原117 規格 0.2ml
Anti-Insulin(1-51 protein)/FITC 熒光素標記胰島素1-51蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗人IgG F(ab')2 規格 0.1ml
Anti-RUNX1/AML1(phospho SerS303) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化急性髓細胞白血病1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-Iba-1/FITC 熒光素標記離子鈣接頭蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1/FITC 熒光素標記蛋白激酶AKT底物1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體 規格 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/PE PE標記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCNT2 英文名稱: β1-6 N-乙酰基葡萄糖轉移酶2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗猴IgM 規格 0.1ml
Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1/FITC 熒光素標記蛋白激酶AKT底物1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml