詳細介紹
細胞名稱 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912培養
形態特性 腹水型
品牌 體內生長
特征特性 1979年12月建立,碘乙酸L7721瘤苗免疫組織經103個活L7721細胞攻擊后,存活33日的615系病鼠脾細胞懸液或腹水,同系小鼠腹腔內接種及傳代形成瘤株,接種*。
培養條件 -
傳代方法 制備成細胞懸液接種至615小鼠。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體 -
使用權限 A類
615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-PAI-2/FITC 熒光素標記纖溶酶原激活物抑制因子2抗體體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規格: 1ml
周期素H抗體 Anti-Cyclin H 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
FAR1 英文名稱: 脂肪酰基輔酶A還原酶1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-VASP(Ser157) 磷酸化血管擴張刺激磷蛋白抗體 規格 0.1ml
mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規格: 1ml
RNP-Ab(Human anti-ribonucleo protein Antibody) ELISA Kit 人抗核糖核蛋白抗體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-IL-33/NFHEV 白介素33抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRP6 低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體 規格 0.2ml
cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit 人組織蛋白酶K 96T
phospho-c-Raf(Ser339) 英文名稱: 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.1ml
C14ORF140 英文名稱: 14號染色體開放閱讀框140抗體 0.2ml
Anti-IL-33/NFHEV 白介素33抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
TIMP-2 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Utrophin 英文名稱: 肌營養不良蛋白相關蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體 規格 0.1ml
P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related) 增殖潛能相關蛋白抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DHRS7C 英文名稱: 短鏈脫氫酶/還原酶家族7C抗體 0.2ml
Anti-Artemin Artemin抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-TTF-1 甲狀腺核轉錄因子-1抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GFAP 膠質纖維酸性蛋白抗體 規格 0.1ml
AVP(Human arginine vasopressin) ELISA Kit 人精酸加壓素 96T
NHLRC1 英文名稱: 肌痙攣性癲癇病相關EPM2蛋白抗體 0.2ml
ADORA2B 英文名稱: 腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體 0.2ml
Anti-TTF-1 甲狀腺核轉錄因子-1抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。