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黑色素瘤相關抗原E2/肝細胞癌相關蛋白3抗體分子標記技術：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質，可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860)磷酸化Ack1抗體

phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

phospho-AMPK beta 1 (Ser108)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體

phospho-ALK (Tyr1604)磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

phospho-ATM(Ser1981)磷酸化毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體

phospho-ATP citrate lyase (Ser455)磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體

phospho-ATR (Ser428)磷酸化ATR抗體

AMN1細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體

ASF1A細胞衰老相關蛋白ASF1A抗體

AGPHD1氨基糖苷類磷酸結構域蛋白抗體

ASGPR1唾液酸糖蛋白受體1抗體

ARSF芳香基硫酸酯酶F抗體

AKAP5A激酶錨定蛋白5抗體

ATXN3L小腦脊髓共濟失調蛋白3抗體

ASTE1ASTE1蛋白抗體

phospho-APG4B(Ser309)磷酸化自噬相關蛋白4B抗體

AFAP微絲相關蛋白1抗體

ADORA1腺苷A1A受體抗體

ARSB芳基硫酸酯酶B抗體

ABATγ氨基丁酸轉氨酶抗體

A2BP1共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體

ADAM17腫瘤壞死因子α轉換酶

ARNT2 芳香烴受體核轉錄蛋白2抗體

ABH8AlkB同源蛋白8抗體