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技術文章

小鼠肝脂酶H?)酶聯免疫試劑包被抗原

閱讀:194          發布時間:2020-5-25

小鼠肝脂酶H?)酶聯免疫試劑盒※包被抗原
1.用50mM的碳酸鹽包被綬沖液(pH9.6)溶解抗原,使抗原濃度為10-20gml,加100u孔到96孔酶標板,4C放置過夜。
2.第二天棄去包被液后,用PBST洗滌3次,每孔加入15019%BSA37C封閉1小時
次后,每孔加入100山不同倍比稀釋度的血清,并加入對照樣品,37孵育2小
4.PBST洗滌5次后,加入100?稀釋后的HRP標記的二抗,37て孵育1小時。
5.PBST洗滌5次后,顯色劑顯色20min后,酶標儀上讀取A405吸收值
※包被細胞
1.在96孔培養板上接種細胞數為1×104 cells/well,37C過夜培養。
2.第二天用PBS洗滌培養板2-3次。
3.加入125uWel10% Forma lin(110稀釋),室溫下固定15min
4.用dH20洗滌培養板3次,并晾干,儲藏在2-8C備用
5.用PBST洗滌3次,每孔加入150山1%BSA37C封閉1小
6.PBST洗滌3次后,每孔加入100山不同倍比稀釋度的血清,并加入對照樣品,37C孵育2小
7.PBST洗滌5次后,加入100山稀釋后的HRP標記的二抗,37孵育1小時。
8.PBST洗滌5次后,顯色劑顯色20min后,酶標儀上讀取A405吸收值。50mM的碳酸鹽包被緩沖液:0.05 mol/L PH9.6碳酸綬沖
液,4C,保存,Na2C030.15克, Nahco30.293克蒸餾水稀釋至100ml

 

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