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蠟樣芽孢桿菌PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-22 13:42:35瀏覽次數:295

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50T
應用領域 化工 主要用途 產品僅用于科研
儲存條件 -20℃避光保存,避免反復凍融 分類 PCR檢測試劑盒
蠟樣芽孢桿菌PCR檢測試劑盒公司正在出售的產品:碩大利什曼原蟲PCR檢測試劑盒 Leishmania majorPCR
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絲狀支原體山羊亞種PCR檢測試劑盒 Mycoplasma mycoidessubsp(capri)PCR

詳細介紹

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產品屬性:
產品名稱:蠟樣芽孢桿菌PCR檢測試劑盒
規格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20
避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

5.png

儲存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3.
細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20
,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
實驗過程:

一、試劑準備

二、操作步驟

1. DNA模板
  2
.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
  3
10×PCR Buffer
  4
2mM dNTPmix:含dATPdCTPdGTPdTTP2mM
  5
Taq

1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
  10×PCR buffer             5μl
  dNTP mixl                 4μl
 
引物110pM               2μl
 
引物210PM              2μl
  Taq
酶(2U/μl              1μl
        DNA
模板(50ng-1μg/μl
???1   μl
 
ddH2O                 50 μl
 
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
 
 

2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,zui后在72 保溫7min
3
.結束反應,PCR產物放置于4
待電泳檢測或-20保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項:
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

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