儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌最基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
85571-15-9草質(zhì);Rhodionin;Herba 規(guī)格: 20mg
630-94-4、51014-29-0去氫鉤藤 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
29106-49-8原花青B2;原矢B2 規(guī)格: HPLC≥98%,5mg/支
27210-57-7丹參新 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
萊菔子對(duì)照藥材 規(guī)格: 1g
諾星(哌) 對(duì)照品 規(guī)格: 100mg;99.4%
551-15-5甘草 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
485-19-8瑞枯靈 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
117-39-5槲皮;Quercetin 規(guī)格: 100mg
2680-81-1去氫二異丁香 規(guī)格: 20mg
榆干側(cè)耳、大榆磨價(jià)格Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml
RPS6 S6核糖體蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
SGTA 小三角四肽重復(fù)區(qū)蛋白α抗體 規(guī)格: 0.2ml
IL-22BP/IL22RA2 白介素22受體結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
RPL5 核糖體蛋白L5抗體 規(guī)格: 0.2ml
FBXW5 FBXW5蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
RKIP/PBP 磷脂酰乙胺結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
LHR/CGR 促黃體生成素受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Wee1(Ser53) 磷酸化WEE1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Frataxin 線粒體型共濟(jì)失調(diào)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
FBP2 肌肉二磷酸抗體 規(guī)格: 0.1ml
CTBP2 C末端結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準(zhǔn)備 選用優(yōu)質(zhì)化學(xué)純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進(jìn)行滅菌:121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。160℃干熱滅菌2個(gè)小時(shí),冷卻后,經(jīng)無(wú)菌檢查后備用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無(wú)菌的液體石蠟在無(wú)菌條件*入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上,液面高出斜面頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏 4.1 注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫(4~6℃)干燥處保藏,保藏時(shí)間2~10年。 4.2 保藏期間應(yīng)定期檢查,如培養(yǎng)基露出液面,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充無(wú)菌的液體石蠟。
5 恢復(fù)培養(yǎng) 恢復(fù)培養(yǎng)時(shí),挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長(zhǎng)繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次。