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羧酸酯酶2(CES2)真核蛋白

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更新時(shí)間:2023-04-18 15:31:14瀏覽次數(shù):472

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說(shuō)明書(shū)
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱(chēng) Eukaryotic Carboxylesterase 2 (CES2) 物種 Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源 真核蛋白 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assays.
羧酸酯酶2(CES2)真核蛋白公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:PDGFC重組人 PDGF-C 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
尾加壓素2受體(UTS2R)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 Receptor (UTS2R)
RAET1E重組人 RAET1E / ULBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
B4GALT1 Protein Human 重組人 B4GALT1 /

詳細(xì)介紹

樣品要求:

1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請(qǐng)?zhí)崆皹?biāo)注說(shuō)明。

2、待標(biāo)記樣品最小標(biāo)記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于1mg/ml。

3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉成分。

4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點(diǎn)、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。

5、請(qǐng)?zhí)崆罢f(shuō)明任何特殊情況。
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱(chēng):羧酸酯酶2(CES2)真核蛋白

 英文名稱(chēng):Eukaryotic Carboxylesterase 2 (CES2)

CE-2; CES2A1; PCE-2; iCE; Intestine,Liver; Methylumbelliferyl-acetate deacetylase 2; Cocaine esterase

酶與激酶

物種:Homo   sapiens (Human,人)

來(lái)源:真核表達(dá)

宿主293F   cell

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:60.6kDa

實(shí)際分子量:56kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Gln27~Leu559   with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM   Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM   EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% TrehaloseProclin300

性狀:凍干粉

純度:>   95%

等電點(diǎn):5.3

應(yīng)用:Positive   Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

 

相關(guān)產(chǎn)品:

尾加壓素2受體(UTS2R)重組蛋白 Recombinant Urotensin 2 Receptor (UTS2R)

B4GALT1 Protein Human 重組人 B4GALT1 / GGTB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PDGFC重組人 PDGF-C 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RAET1E重組人 RAET1E / U

特性

重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,-80條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因?yàn)槿芙獠缓脮?huì)降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過(guò)程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶(hù)在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問(wèn)題。

(1)原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護(hù)劑,使用過(guò)濾后的無(wú)菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100 μg,86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩或劇烈搖晃。

(2)真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進(jìn)行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進(jìn)行,如哺乳動(dòng)物細(xì)胞能夠識(shí)別和去除基因中的內(nèi)含子,對(duì)翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,這樣表達(dá)的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來(lái)保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

(3)類(lèi)固醇還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護(hù)劑。在凍干和儲(chǔ)存過(guò)程中常用的保護(hù)劑或穩(wěn)定劑有糖類(lèi),多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護(hù)劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)改變以及凍干過(guò)程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護(hù)劑和填充劑。

操作步驟:

實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融。

培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL0.5 mL

5.置于4搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6 14,000rpm,4離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融

賈第蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Giardia spp.PCR 50T

鳩寧病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Junin Virus(JUNV)RTPCR 50T

克雷伯菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Klebsiella spp.PCR 50T

潰瘍棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Corynebacterium ulceransPCR 50T

Matriptase 蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-AMPK alpha 2 腺苷單0酸活化蛋白α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Thr401) 0酸化B-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

檸檬酸鹽溶液-即枸櫞酸鹽 2L/ 10mM pH 6.0,低背景著色

VGAT 英文名稱(chēng): 基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VGAT抗體 0.1ml

DDIT4L 英文名稱(chēng): DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 0.2ml

Anti-AMPK alpha 2 腺苷單0酸活化蛋白α2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

羧酸酯酶2(CES2)真核蛋白布氏羅得西亞錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Trypanosoma brucei rhodesiensePCR

布氏岡比亞錐蟲(chóng) 英文名稱(chēng); Trypanosoma brucei gambiense

布氏布氏錐蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Trypanosoma brucei bruceiPCR

布尼亞維拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng); Bunyamwera VirusRTPCR

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

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