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人脈絡膜血管內皮細胞培養方法
閱讀：203 發布時間：2018-7-2人脈絡膜血管內皮細胞培養方法
一、產品簡介
1. 產品名稱：人脈絡膜血管內皮細胞
2. 組織來源：脈絡膜組織
3. 產品規格：5×105cells/T25 細胞培養瓶
4. 細胞簡介：
人脈絡膜血管內皮細胞培養方法人脈絡膜血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之
間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從
前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵
抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，
圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜
的后2/3 處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在
鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含
有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光
作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節
作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。
本公司生產的脈絡膜血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過
內皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經
CD31/vWF 免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支
原體、細菌、酵母和真菌等。
5. 培養基信息：
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、
Penicillin、Streptomycin 等
二、細胞培養狀態發貨時發送
細胞電子版照片
人脈絡膜血管內皮細胞培養方法三、使用方法
在技術部標準操作流程下，人脈絡膜血管內皮細胞可傳3-5 代；建議您收到細胞
后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25 細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25 細胞培養瓶中的培養基，用PBS 清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL 至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個
培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀
察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml *培養基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3 適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完
全培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察；之后每隔2-3 天更換新鮮的*培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6 個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3 天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和
技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我
們，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得
到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考