ELISA 基 礎 知 識

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● ELISA = Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay ：

酶聯(lián)免疫吸附檢測，利用抗原抗體的特異性反應，對樣本中可溶性目的產(chǎn)物進行定量檢測

● ELISA 與常規(guī)免疫實驗對比：

ELISA樣本制備簡單；靈敏度高（pg/ml）；特異性強；重復性好；操作簡單；檢測儀器易獲得（酶標儀）。

● ELISA 種類

● 各種 ELISA 特點

● ELISA 應用場景

八 大 質(zhì) 控 指 標

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不是所有的ELISA試劑盒開發(fā)都如此嚴格！

每個指標的ELISA試劑盒都進行了8大指標的質(zhì)控。6項利。ISO9001質(zhì)量管理體系。值得您信賴！

ELISA 實 驗 步 驟

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● ELISA簡要步驟（雙抗體夾心法）

ELISA 操 作 注 意 事 項

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標 準 曲 線 擬 合

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標準品濃度和相應的吸光度（OD）值如果能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系是想的，這時可以通過Excel等方便的獲得擬合曲線，進而推算出樣品的濃度值。但我們做免疫檢測很少能夠有這么理想的情況，標品濃度和相應OD值往往是"S"型的曲線關(guān)系，這時就不能用直線擬合的方式了，而對擬合方法進行選擇就是必要的了。

關(guān)于標準曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學反應中的曲線擬合，但都只適用于曲線的一部分。Logistic曲線則對曲線的全部都有較好的適用性。在一個長的區(qū)間內(nèi)，Logistic應該都能擬合得較為理想。用來定量，S形曲線的中間段（較陡處）是比較好的，而兩端的平坦部分計算誤差會大，有時甚至會很大。

所以關(guān)鍵在于你檢測的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低濃度部分可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部分可以用直線方程，中間部分可用對數(shù)方程，而中后段可用四參數(shù)。

目前國際上流行的免疫檢測擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合"，用這種擬合方式往往能夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關(guān)系，從而獲得比較正確的樣品中待測物質(zhì)的濃度值。