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間充質(zhì)干細(xì)胞有望通過治療患者酒精性肝病
閱讀：437 發(fā)布時(shí)間：2020-2-14 酒精性肝病（ALD）是范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率高的慢性肝病的主要原因。根據(jù)近的一項(xiàng)回顧，中國的酒精性肝病患病率約為4.5％，令人震驚的是，它將超過美國（6.2％）和歐洲國家（6％），并且已經(jīng)使鄰國日本（1.56-2.34）相形見絀。
酒精性肝病是一種復(fù)雜的疾病，涵蓋了廣泛的肝病灶，包括脂肪變性，酒精性肝炎（AH），進(jìn)行性纖維化，肝硬化和肝細(xì)胞增生癌，可能會(huì)分別，同時(shí)或依次在患者中發(fā)生。酒精性肝炎是壞死性炎癥過程可能導(dǎo)致在40％的病例肝硬化由于其與纖維化的進(jìn)展關(guān)聯(lián)，并且患者無酒精性肝炎處于發(fā)展肝硬化。
嚴(yán)重的酒精性肝炎與*的短期死亡率相關(guān)，在3個(gè)月時(shí)約20–50％，是致命的疾病之一。盡管細(xì)胞損傷，氧化應(yīng)激，炎癥和細(xì)菌易位是酒精性肝病的驅(qū)動(dòng)因素，并且已經(jīng)進(jìn)行了多次嘗試來改善患者的預(yù)后，但是對于酒精中毒和糖皮質(zhì)激素暴露于重癥患者，仍然沒有比這更成功的治療方法。
間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是可以從許多的身體部位，如骨髓（BM）[獲得多能性細(xì)胞群]，脂肪組織，臍帶和胎盤。這些細(xì)胞易于分離，可以在培養(yǎng)中迅速擴(kuò)增并分化為多種細(xì)胞譜系，似乎是細(xì)胞療法的理想來源。
先前的研究表明，TSG-6能夠抑制許多信號(hào)傳導(dǎo)途徑，例如有絲分裂原激活的蛋白激酶（MAPKs）途徑和核因子（NF）-κB途徑，并且這些信號(hào)傳導(dǎo)途徑也已經(jīng)被在酒精性肝病。
以前的研究還報(bào)告說，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活子3（STAT3）信號(hào)傳導(dǎo)途徑在ALD的發(fā)病機(jī)理，和急性酒精攝入能激活STAT3信號(hào)。然而，尚不清楚STAT3信號(hào)傳導(dǎo)與AH如何相關(guān)以及MSC是否可以通過TSG-6和/或與STAT3信號(hào)傳導(dǎo)相互作用來發(fā)揮其在AH中的功效。因此以研究以下三個(gè)問題：首先，確認(rèn)MSCs對AH的療效；第二，探討TSG-6與MSCs對AH的療效的關(guān)系。第三，研究STAT3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與MSCs治療AH的相關(guān)性。
使用8-10周齡的雌性小鼠，引入兩劑以上的乙醇管飼來誘導(dǎo)更嚴(yán)重的酒精性肝炎（AH)。
在建模期的第3天，第6天和第11天，給AH組的小鼠灌胃單劑量的乙醇（31.5％乙醇（v / v），400μl/小鼠），而給對照組的小鼠灌胃等溫的糊精麥芽糖（45％（w / v），400μl/小鼠）。
在第10天，將有或沒有轉(zhuǎn)染的MSC腹膜內(nèi)（ip）給予AH + MSC，AH + sc-MSC，AH + siTSG-6-MSC和AH + MSC + AG490組（5×10 6細(xì)胞/小鼠）；注射MSC后，向AH + MSCs + AG490組（20μg/小鼠，腹腔注射）再加一劑AG490。
直到第11天，盡管AH組的肝臟/體重比與對照組相比更高，但所有組之間均觀察到相似的體重增加。腹膜內(nèi)注射MSCs（5×10 6個(gè)細(xì)胞/小鼠）可顯著改善肝臟損傷參數(shù)，例如肝臟/體重比。
在對照組中，除肝細(xì)胞膨脹外，沒有發(fā)現(xiàn)明顯的肝損傷跡象（ i，n）。與這些數(shù)據(jù)一致，我們觀察到腹膜內(nèi)注射MSCs（5×10 6個(gè)細(xì)胞/小鼠）顯著抑制了全身和肝臟的炎癥反應(yīng)，這反映在促炎細(xì)胞因子（即白介素（IL）-6，TNF-α，環(huán)-加氧酶（Cox）-2）與AH組相比，AH + MSC組的抗炎細(xì)胞因子（即IL-10，TSG-6）升高。
接下來研究了MSC在AH中發(fā)揮治療作用的機(jī)制。由于大量的研究報(bào)告，通過分泌作用，干細(xì)胞TSG-6在其他疾病模型，試圖調(diào)查是否間充質(zhì)干也由TSG的策略，通過分泌TSG-6工作-6擊倒并模仿。
與未經(jīng)治療的AH小鼠相比，腹腔注射5×10 6個(gè)細(xì)胞/小鼠可顯著降低肝/體重比，肝酶以及血液和肝脂質(zhì)。但是，腹膜內(nèi)注射5×10 6 siTSG-6-MSCs /小鼠后，這些作用明顯減弱，但是腹膜內(nèi)注射5×10 6 sc-MSCs /小鼠后這些作用并未受到影響。同時(shí)，ipTSG-6（10μg/小鼠）的腹膜內(nèi)注射顯示出與MSC或sc-MSC注射相當(dāng)?shù)男ЧＱ趸瘧?yīng)激是ALD的已知驅(qū)動(dòng)因素。
研究人員觀察到與未治療的小鼠相比，腹腔注射5×10 6個(gè) MSC /小鼠顯著降低了肝MDA，但增加了GSH的肝儲(chǔ)備，而注射siTSG-6-MSC卻顯著否定了sc-MSC，這與未治療的小鼠明顯相反rmTSG-6的給藥模擬了MSC或sc-MSC的作用。
類似地，5×10周的腹膜內(nèi)注射6的MSC /小鼠顯著緩解了肝脂肪變性，肝細(xì)胞氣球，壞死性炎癥和相應(yīng)的組織學(xué)分?jǐn)?shù)。
根據(jù)這些發(fā)現(xiàn)，siTSG-6-MSC而非sc-MSC顯著降低了IL-6，TNF-α和Cox 2的水平（a –h）并增強(qiáng)了IL-10和TSG-6（a –h）。 5i–n）小鼠血液和肝臟發(fā)炎的水平。rmTSG-6的外源給藥產(chǎn)生的結(jié)果與MSC和sc-MSC相似，但與siTSG6-MSC無關(guān)。間充質(zhì)干細(xì)胞通過分泌TSG-6抑制STAT3信號(hào)傳導(dǎo)減少乙醇誘發(fā)的肝損傷
探討可能的作用機(jī)制在小鼠MSCs的影響底層啊，評估了STAT3信號(hào)，因?yàn)镾TAT3據(jù)報(bào)道，ALD發(fā)揮顯著作用。研究人員觀察到STAT3信號(hào)傳導(dǎo)的AH組顯著激活相比于正常對照組，通過增加的磷酸化STAT3（P-STAT3）的水平所反映，盡管STAT3水平?jīng)]有改變。 腹膜內(nèi)給予MSC或sc-MSC但未給予siTSG-6-MSC（5×10 6個(gè)細(xì)胞/小鼠）后，p-STATs水平顯著降低，但與未治療的小鼠相比，STAT3水平?jīng)]有變化。
此外，rmTSG-6的腹膜內(nèi)注射產(chǎn)生磷酸化STAT3的類似抑制到MSC或SC-MSC的，而STAT3不受影響所示。
有趣的是，與單獨(dú)給予MSC相比，腹膜內(nèi)注入AG490（一種STAT3信號(hào)抑制劑）和MSC可以進(jìn)一步抑制p-STAT3，但不能抑制STAT3水平，這也導(dǎo)致AH的改善更為明顯。所有這些數(shù)據(jù)均支持MSC通過TSG-6發(fā)揮作用，進(jìn)而可能抑制STAT3信號(hào)傳導(dǎo)。