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上海雅吉生物科技有限公司>技術文章>小鼠骨骼肌衛星細胞說明書

技術文章

小鼠骨骼肌衛星細胞說明書

閱讀:374          發布時間:2019-12-23

一、產品簡介

1. 產品名稱:小鼠骨骼肌衛星細胞

2. 組織來源:四肢肌肉組織

3. 產品規格5×105 cells/T25 細胞培養瓶

4. 細胞簡介

小鼠骨骼肌衛星細胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,

約占全身重量的 40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼

附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。

每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀

體神經支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止

點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。

骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細

胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的

明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條

較明亮的線稱 H 線。H 線的中部有一 M 線。明帶中間,有一條較暗的線稱為 Z 線。

兩 個 Z 線之間的區段,叫做一個肌節。骨骼肌衛星細胞指骨骼肌中除骨骼肌細胞

外的 一種扁平、有突起的細胞。附著于肌細胞表面;當肌細胞受損后,骨骼肌衛星

細胞 可增殖分化,參與肌細胞的修復,因此具有干細胞性質。多數細胞伸展呈長

梭形, 胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,

高低起 伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。

傳代后 細胞生長較快,4-6 天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

本公司生產的小鼠骨骼肌衛星細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為

5×105 cells/瓶;細胞經 Desmin 免疫熒光鑒定,純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1

HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5. 培養基信息

我們推薦使用小鼠骨骼肌衛星細胞*培養基作 為體外培養小鼠骨骼肌衛星細胞

的培養基。

二、細胞培養狀態發貨時發送細胞電子版照

三、使用方法在技術部標準操作流程下,小鼠骨骼肌衛星細胞可傳1-3 代左右,隨著傳代次

數的增加,細胞會呈現老化狀態,生長速度減緩,1 代以內細胞狀態;建議您收

到 細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1.

取出 T25 細胞培養瓶,用 75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入 37℃、5%CO2、飽

和 濕度的細胞培養箱中靜置 3-4h,以穩定細胞狀態。

2.

待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出 T25 細胞培養瓶中的培養基,用 PBS 清洗細胞一次;

2) 添加 0.25%胰蛋白酶消化液 1mL 至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培

養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴 1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細

胞回縮變圓后,再加入 5ml*培養基終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按 1:2-1:3 適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*

培 養基至 5mL,置于 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察;之后每隔 2-3 天更換新鮮的*培養基。

四、注意事項

1.

培養基于 4℃條件下可保存 3-6 個月。

2.

在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。

3.

傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前 3 天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和

技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時 和我

們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題 得

到解決。

5.

該細胞只可用于科研。

備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考

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