紫外可見分光光度計光度重復性( Photometric Repeatability ) , 又稱光度精密度( PhotometricPrecision) , 是紫外可見分光光度計的很重要的技術指標。它被定義為多次測量( 一般為3～5 次, 有時要求7 次) 中, 大值與小值之差。光度重復性還表征紫外可見分光光度計分析測試結果的可靠性。
一、光度重復性的測試方法
我國1996 年制訂的紫外可見分光光度計國家計量檢定規(guī)程規(guī)定, 光度重復性要測試3 次, 取3 次中的大小值之差作為光度重復性。光度重復性的測試方法是選定一個標準樣品( 也可用使用者自己任選的樣品) , 由同一個操作者,進行3～5 次測試, 再計算光度重復性。具體操作方法為: 儀器冷態(tài)開機(即關機2h 后開機) , 預熱0. 5h 后, 對標準樣品或使用者自選的樣品進行光譜掃描, 而后在譜圖上選擇幾個特征吸收峰, 檢查在選定的測量次數內, 各個峰值的大小值之差即為光度重復性。人們經常將光度準確度和光度重復性在一次操作中完成。
儀器穩(wěn)定可靠, 其中很重要的一點就是光度重復性好?？梢栽O想: 一臺紫外可見分光光度計, 它的功能很強大、自動化程度很高、外形美觀、價格合理, 但它測出的數據不能重復, 那肯定不是好儀器。
二、影響光度重復性的主要因素
影響紫外可見分光光度計光度重復性的主要因素有以下幾種。
1. 光源系統
光源系統即指燈泡和電源。如果氘燈或鎢燈燈泡本身的質量不好, 即使電源很好, 氘燈或鎢燈發(fā)出的光通量肯定不穩(wěn)。這樣, 紫外可見分光光度計就不可能得到好的、穩(wěn)定的測試結果。如果氘燈或鎢燈的燈泡很好, 但其電源不穩(wěn), 那么光源系統(燈泡) 發(fā)出的光通量也不可能穩(wěn), 也不可能得到好的光度重復性。
2. 光電轉換器系統
光電轉換器系統包括光電轉換元件( 光電倍增管、光電管、硅光電池等)及其供電電源; 光電轉換元件是將光信號轉換成電信號的關鍵元件。不管紫外可見分光光度計的其他元部件( 如光電轉換元件的供電電源) 多好, 如果光電轉換元件不好( 如它一直在波動或漂移) , 就不可能得到好的光度重復性。
反之, 如果光電轉換元件很好, 其供電電源不好, 電源一直在波動或漂移, 也不可能得到好的光度重復性。因此, 紫外可見分光光度計的制造者和使用者一定要高度重視光電轉換器系統對光度重復性的影響。
3. 電學系統(放大器、V/ D 變換等)
如果電學系統不穩(wěn)定, 也會影響光度重復性。如放大器有漂移、V/ D 變換不穩(wěn)定, 都會使紫外可見分光光度計的分析測試結果不會重復。
4. 環(huán)境
如果周圍有電場干擾、磁場干擾等, 也不可能得到好的光度重復性。放置紫外可見分光光度計儀器場所的溫度、濕度, 也會影響儀器的光度重復性。因為儀器的電子元件, 一般都會受溫度的影響而改變其性能。
紫外可見分光光度計的光度重復性的表示也應規(guī)范, 如果光度重復性設計指標為“0. 001Abs”, 因檢測不出, 5 次測試的結果全是“0”, 此時正確的表示方法是寫“ 光度重復性優(yōu)于0. 001Ab s; 或小于0. 001Abs”。
