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EIN3(乙烯不敏感3)在乙烯反應途徑中起著積極的調節作用,是成年植物組織乙烯反應所必需的。由MPK3和MPK6磷酸化激活(PubMed:18273012)。被KIN10下調,KIN10以磷酸化依賴的方式控制其蛋白質穩定性。
別名:蛋白質乙烯不敏感3。
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產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
抗EIN 3|乙烯不敏感3抗體 | AS23-4896 | 查看 |
抗EIN 3|乙烯不敏感3抗體:
免疫原:
擬南芥重組EIN3蛋白的一部分,UniProt: O24606,TAIR: AT3G20770
宿主:兔
克隆性:多克隆
純度:抗原親和純化的血清,pH 7.4的PBS中
格式:凍干
數量:50 ?g
復溶:復溶時加入50 ?l無菌或去離子水。
儲存:凍干/復溶后儲存于-20°C;復溶后分裝以避免反復凍融。請在打開前短暫離心試管,以避免凍干物質粘附在試管蓋或側壁而導致損失。
已測試應用:Western blot (WB)
推薦稀釋度:1:1000 (WB)
預期 | 表觀分子量:78 | 71.4 kDa(由于N端處理)
已確認反應性:擬南芥
未反應性:大麥
樣品:
分子量標記:Thermo Scientific?的PageRuler?
1. 擬南芥野生型Col-0
2. 擬南芥ein2-1突變體
3. 擬南芥ein3-1突變體
4. 擬南芥eil1-1突變體
5. 擬南芥ein3-1/eil1-1突變體
從10天大的擬南芥幼苗中新鮮提取總蛋白,使用植物蛋白提取緩沖液(50 mM Tris/HCl pH7.5,150mM NaCl,1% Triton-X100,1%牛磺膽酸鈉,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM DTT,1% Thermo Scientific? Halt?蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物和50 ?M MG132)。樣品的蛋白濃度通過Bio-Rad RC/DC?蛋白測定試劑盒測定并調整至相同濃度。調整后的樣品與2x SDS樣品緩沖液(125 mM Tris/HCl pH6.8,4% SDS,20%甘油,10% β-巰基乙醇,0.2 mg/ml溴酚藍)以1:1混合,并在95°C下變性10分鐘。每孔40 ?g蛋白在Bio-Rad 4–20% Mini-PROTEAN? TGX?凝膠上分離,并使用濕槽轉移法轉移到0.45 ?m孔徑的PVDF膜上,轉移時間為1小時。膜用TBS中的10%脫脂奶粉在室溫下攪拌1小時封閉。膜在TBS + 3% BSA中稀釋至1:1000的抗EIN3一抗(AS23 4896)中在4°C下過夜攪拌孵育。倒掉抗體溶液,膜在室溫下用20 ml TBS-T攪拌洗滌3次,每次10分鐘。膜在TBS中稀釋至1:10000的Invitrogen?山羊抗兔IgG (H+L) HRP偶聯二抗中在室溫下攪拌孵育1小時。膜在室溫下用20 ml TBS-T攪拌洗滌4次,并用高靈敏度化學發光檢測試劑顯影5分鐘。曝光時間為15秒,使用Bio-Rad ChemiDoc系統。
感謝美國密歇根州立大學DOE-植物研究實驗室的Jian Yao博士提供
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抗EIN 3|乙烯不敏感3抗體抗EIN 3|乙烯不敏感3抗體
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