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用于定量測定人血清中游離三碘甲狀腺原氨酸(fT3)濃度。僅供研究使用。不用于診斷程序。
作為ALPCO在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 試劑盒, (96 孔)。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 試劑盒, (96 孔) | ALP-25-FT3HU-E01 | 查看 |
fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 試劑盒, (96 孔)檢測原理:
fT3檢測是一種固相競爭酶免疫測定法。將血清樣本、標準品和T3酶偶聯物工作試劑加入涂有單克隆T3抗體的孔中。樣品中的游離T3和T3標記的綴合物競爭抗體上的可用結合位點。在室溫下孵育60分鐘后,用水洗滌孔以去除未結合的T3綴合物。然后加入TMB底物并孵育20分鐘,導致藍色的發展。通過加入停止溶液停止顯色,并在450nm處用分光光度法測量吸光度。形成的顏色強度與存在的酶的量成正比,與樣品中未標記的fT3的量成反比。通過參考一系列以相同方式測定的fT3標準品,對未知樣品中的fT3濃度進行定量。
試劑
試劑盒提供的材料:
- 抗體涂層微孔板(1板,96孔)
微孔板孔涂有抗T3抗體
- fT3-酶結合物試劑,即用型(1瓶,10.5 mL)
含有與辣根過氧化物酶結合的T3抗體和防腐劑
- 自由T3參考標準套裝(1.0 mL/瓶)
含有人血清中的0, 0.9, 2.2, 5.0, 9.0 和 19.0 pg/mL的fT3,含防腐劑;液體,即用型。具體水平在批次特定的標簽上給出。
- 顯色試劑A(1瓶,13 mL)
含有醋酸緩沖液中的過氧化氫
- 顯色試劑B(1瓶,13 mL)
含有在緩沖溶液中穩定的3,3',5,5'四甲基聯苯胺(TMB)
- 停止溶液(3N鹽酸)(1瓶,10 mL)
含有稀釋的鹽酸
需要但不提供的試劑:
- 能夠提供50 ?L體積,精度優于1.5%的移液管
- 能夠重復提供50 ?L和200 ?L體積,精度優于1.5%的分配器
- 具有450 nm波長吸收能力的微孔板讀取器
- 用于稀釋酶結合物和混合顯色試劑A與顯色試劑B的試管
- 用于吸干微孔板孔的吸水紙
- 計時器
- 質量控制材料
樣本收集和準備
應從通過可接受技術獲得的全血樣本中制備血清。此試劑盒僅用于無添加劑的血清樣本。血清樣本可在2-8°C下冷藏,最長時間48小時。如果樣本無法在48小時內測定,它們可以儲存在-20°C下,長達30天。
試劑盒和儀器的儲存
未開封的試劑盒在收到后應存放在2-8°C,并應將微孔板保存在帶有干燥劑的密封袋中,以盡量減少潮濕空氣的接觸。按照上述描述儲存的開封試劑盒,直到顯示的有效期前都保持穩定。在450 nm波長下,具有10 nm或更小帶寬和0-2 OD或更大光密度范圍的微孔板讀取器適用于吸收測量。
標準曲線示例:
結果計算1。計算每組參考標準品、對照品和樣品的平均吸光度值(A450)。通過在方格紙上繪制每個參考標準的平均吸光度與其濃度(單位為pg/mL)的關系圖,構建標準曲線,吸光度值在垂直軸或Y軸上,濃度在水平軸或X軸上。使用每個樣品的平均吸光度值從標準曲線中確定相應的fT3濃度,單位為pg/mL
ALPCO產品種類多樣,可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等,涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域,尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。
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