α-酮戊二酸是由異檸檬酸的氧化脫羧作用產生的,也是谷氨酸脫氨基作用的酮酸產物。它在三羧酸循環(TCA循環)中作為細胞能量代謝的關鍵中間體發揮作用。此外,它還作為一種氮轉運體,促進氨基酸合成,同時抑制肌肉中的蛋白質降解。
Cell Biolabs的α-酮戊二酸(α-KG)檢測試劑盒提供了一種簡單便捷的方法,用于在96孔板格式中測量α-KG。α-KG通過轉氨基作用生成丙酮酸,隨后通過比色法或熒光探針進行檢測。每個試劑盒提供了足夠的試劑,用于100次檢測,包括空白、標準品和未知樣本。
艾美捷α-酮戊二酸測定試劑盒(比色法)(#MET-5131)通過偶聯酶促反應來測量α-KG。α-KG通過轉氨基作用生成丙酮酸,隨后通過比色探針進行檢測。樣本和標準品孵育60-180分鐘后,使用標準的96孔分光光度計平板讀數器(540-570 nm)進行讀取。樣本與96孔微量滴定板格式中的已知濃度α-KG標準品進行比較。
α-酮戊二酸測定試劑盒(比色法)組分(在藍色冰袋上運輸):
1. α-KG反應轉換劑(部件編號51311C):1支750 µL試管
2. α-KG底物混合液(部件編號51322B):1支750 µL試管
3. α-酮戊二酸標準品(部件編號51321C):1支100 µL試管,100 mM溶液
4. α-KG酶混合液(部件編號51312C):1支150 µL試管
5. 比色探針(部件編號51253C):1支150 µL棕色試管
6. 過氧化氫酶(HRP,部件編號234402):1支100 µL試管,100 U/mL甘油溶液
7. 10X檢測緩沖液(部件編號50292A):1瓶25 mL
儲存:
收到后,將α-KG底物混合液和10X檢測緩沖液儲存于4°C。其余組分儲存于-20°C。
結果示例:
以下圖表展示了典型的α-酮戊二酸檢測試劑盒結果。以下數據僅供參考,不應用于解釋或計算實際樣本結果。
圖上:α-酮戊二酸標準曲線示例。
圖下:肝臟勻漿。將雞肝在冷1X檢測緩沖液中勻漿和超聲處理。離心后,根據檢測協議對勻漿液進行檢測。
α-酮戊二酸測定試劑盒(比色法)引用文獻:
Cappello, A. et al. (2022). Extracellular serine empowers epidermal proliferation and psoriasis-like symptoms. Sci Adv. 8(50):eabm7902. doi: 10.1126/sciadv.abm7902 (#MET-5131).
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