惡性腫瘤細(xì)胞侵入正常周?chē)M織的能力在很大程度上導(dǎo)致了癌癥的高發(fā)病率和死亡率。侵入性需要幾種不同的細(xì)胞功能，包括黏附、運(yùn)動(dòng)、脫落和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白水解。轉(zhuǎn)移性細(xì)胞產(chǎn)生許多蛋白水解酶（例如溶酶體水解酶、膠原酶、纖溶酶原激活劑），同時(shí)某些細(xì)胞表面蛋白酶受體的表達(dá)也增加。

Cell Biolabs的CytoSelect 96孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒利用涂有基底膜的插入物來(lái)檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的侵襲特性。該試劑盒無(wú)需您預(yù)先用Calcein AM標(biāo)記細(xì)胞或移除未侵入的細(xì)胞（即棉簽擦拭）。任何侵入的細(xì)胞首先從膜上分離，然后裂解并用CyQuant® GR染料檢測(cè)。

Cell Biolabs的CytoSelect 96孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒提供了一個(gè)穩(wěn)健的系統(tǒng)，用于定量測(cè)定細(xì)胞侵襲。試劑盒包含足夠的試劑用于評(píng)估96個(gè)樣本。

艾美捷CytoSelect 96孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒（#CBA-112）檢測(cè)原理： 

CytoSelect 96孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒包含一個(gè)96孔板中的聚碳酸酯膜插入物（孔徑8微米）。插入物膜的上表面涂有一層均勻的干燥基底膜基質(zhì)溶液。這層基底膜作為屏障，區(qū)分侵襲性細(xì)胞和非侵襲性細(xì)胞。侵襲性細(xì)胞能夠降解該層中的基質(zhì)蛋白，并最終通過(guò)聚碳酸酯膜的孔。最后，侵入的細(xì)胞從膜上分離，并隨后用CyQuant® GR染料（Invitrogen）檢測(cè)。

相關(guān)產(chǎn)品：

1.CBA-101-C：CytoSelect24孔細(xì)胞遷移和侵襲檢測(cè)（8微米，熒光法）

2.CBA-106-C：CytoSelect96孔細(xì)胞遷移和侵襲檢測(cè)（8微米，熒光法）

3.CBA-111：CytoSelect24孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)（基底膜，熒光法）

4.CBA-111-COL：CytoSelect24孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)（I型膠原，熒光法）

5.CBA-112-COL：CytoSelect96孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)（I型膠原，熒光法）

CytoSelect 96孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒組成（室溫運(yùn)輸）：

1.96孔ECM侵襲板（部件編號(hào)11201）：一個(gè)含有ECM涂覆插入物的無(wú)菌96孔板（見(jiàn)圖1了解組件）。

2.96孔細(xì)胞收獲托盤(pán)（部件編號(hào)10402）：一個(gè)96孔托盤(pán)。

3.細(xì)胞分離液（部件編號(hào)10403）：一瓶20毫升。

4.4倍裂解緩沖液（部件編號(hào)10404）：一瓶10毫升。

5.CyQuant®GR染料（部件編號(hào)10105）：一個(gè)75微升的管。

未提供材料

1.侵襲性細(xì)胞系

2.細(xì)胞培養(yǎng)基

3.無(wú)血清培養(yǎng)基，例如含有0.5%BSA、2mMCaCl?和2mMMgCl?的DMEM

4.細(xì)胞培養(yǎng)箱（37°C，5%CO?環(huán)境）

5.顯微鏡

6.96孔微量滴定板

7.微量滴定板讀數(shù)器

儲(chǔ)存

將所有組分儲(chǔ)存于4°C。  

結(jié)果示例：  

下圖顯示了CytoSelect™細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒的典型情況。以下數(shù)據(jù)僅供參考。這些數(shù)據(jù)不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

HT-1080細(xì)胞在細(xì)胞分離緩沖液中進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)S后用4倍裂解緩沖液/CyQuant® GR染料進(jìn)行裂解和檢測(cè)（150 µL細(xì)胞懸浮液與50 µL 4倍裂解緩沖液/染料混合）。

HT-1080或NIH3T3細(xì)胞被允許向10%胎牛血清（FBS）方向侵襲24小時(shí)，實(shí)驗(yàn)中加入或不加入2 µM細(xì)胞松弛素D，每次實(shí)驗(yàn)使用200,000個(gè)細(xì)胞。侵入聚碳酸酯膜底部的細(xì)胞被染色（見(jiàn)圖），并按照實(shí)驗(yàn)方案中描述的方法用CyQuant® GR染料進(jìn)行定量分析。

CytoSelect 96孔細(xì)胞侵襲檢測(cè)試劑盒文獻(xiàn)參考：

1. Erkell, L. J., Schirrmacher, V. (1988) Cancer Res 48, 6933-6937.

2. Montgomery, A. M. P., De Clerck, Y. A., Langley, K. E., Reisfeld, R. A., Mueller, B. M. (1993)Cancer Res 53,693-700.

3. Monsky, W. L., Lin, C. Y., Aoyama, A., Kelly, T., Akiyama, S. K., Mueller, S. C., Chen, W. T.(1994) Cancer Res 54,5702-5710.