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PARP底物混合物1在DNA損傷修復(fù)研究中的應(yīng)用與機(jī)制

時(shí)間:2025/3/4閱讀:54
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聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(Poly ADP-ribose polymerase, PARP)是細(xì)胞DNA損傷修復(fù)通路中的關(guān)鍵酶家族,其通過(guò)催化ADP核糖基化修飾靶蛋白,參與DNA單鏈斷裂修復(fù)、染色體重塑及基因組穩(wěn)定性維持。近年來(lái),PARP抑制劑作為靶向治療藥物在癌癥領(lǐng)域取得了突破性進(jìn)展,而研究PARP活性及其調(diào)控機(jī)制離不開(kāi)對(duì)其底物的深入理解。其中,PARP底物混合物1PARP Substrate Cocktail 1)作為一種標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)試劑,在基礎(chǔ)研究與藥物開(kāi)發(fā)中扮演了重要角色。

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艾美捷PARP底物混合物1

貨號(hào):BPQ-78366

描述:PARP底物混合物1是一種含有生物素標(biāo)記和未標(biāo)記底物(NAD?)的混合物。  

提供形式:Tris緩沖液溶液。  

儲(chǔ)存:收到后,請(qǐng)于-80°C保存。  

穩(wěn)定性:在-80°C保存時(shí),產(chǎn)品在s次解凍后可穩(wěn)定保存六個(gè)月。避免反復(fù)凍融。  

 

PARP底物混合物1應(yīng)用:  

適用于使用細(xì)胞提取物或純化蛋白的PARP實(shí)驗(yàn)。該混合物已針對(duì)以下產(chǎn)品進(jìn)行了優(yōu)化:  

• PARP 1化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)試劑盒(BPS Bioscience #80551)  

• PARP 2化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)試劑盒(BPS Bioscience #80552)  

• PARP 3化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)試劑盒(BPS Bioscience #80553)  

在其他實(shí)驗(yàn)中使用可能需要進(jìn)一步優(yōu)化。

 

應(yīng)用場(chǎng)景與實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢(shì)

PARP活性定量分析

通過(guò)檢測(cè)ADP核糖聚合物(PAR)的生成量,可評(píng)估PARP在不同處理(如DNA損傷劑、抑制劑)下的活性變化。例如,在腫瘤細(xì)胞中驗(yàn)證PARP抑制劑(如奧拉帕尼)的效能時(shí),底物混合物1可提供穩(wěn)定、可重復(fù)的反應(yīng)體系。

 

藥物篩選與開(kāi)發(fā)

藥物研發(fā)中,PARP底物混合物1常與重組PARP酶及候選化合物庫(kù)聯(lián)用,通過(guò)檢測(cè)底物消耗或產(chǎn)物生成速率,快速篩選潛在抑制劑或增強(qiáng)劑。

 

機(jī)制研究

結(jié)合CRISPR基因編輯技術(shù)或蛋白質(zhì)互作分析,可研究PARP底物代謝與DNA修復(fù)通路(如同源重組修復(fù)缺陷)的關(guān)聯(lián)性,揭示合成致死效應(yīng)的分子基礎(chǔ)。

 

PARP底物混合物1在癌癥研究中的應(yīng)用:

一項(xiàng)針對(duì)BRCA1突變型卵巢癌的研究中,科研團(tuán)隊(duì)利用PARP底物混合物1評(píng)估了PARP-1在不同化療藥物處理后的活性變化。結(jié)果顯示,順鉑誘導(dǎo)的DNA損傷顯著激活PARP-1,而聯(lián)合使用PARP抑制劑后,PAR鏈的積累被有效抑制,驗(yàn)證了“合成致死"理論的可行性。該實(shí)驗(yàn)的成功依賴于底物混合物1的高信噪比和穩(wěn)定性。

 

文獻(xiàn)參考:

Gibson, B. A., & Kraus, W. L. (2012). New insights into the molecular and cellular functions of poly(ADP-ribose) and PARPs. Nature Reviews Molecular Cell Biology.

Lord, C. J., & Ashworth, A. (2017). PARP inhibitors: Synthetic lethality in the clinic. Science.

廠商技術(shù)手冊(cè):PARP Substrate Cocktail 1 (e.g., Merck Millipore, #1168-100).


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