許多具有生物活性的肽和蛋白質以焦谷氨酸(pGlu)作為其第一個氨基酸。這種修飾可以保護它們免受氨基肽酶的降解,并且在許多情況下決定了蛋白質或肽的功能。然而,焦谷氨酸修飾有時也可能導致負面副作用。例如,經過焦谷氨酸修飾的β-淀粉樣肽(pGlu-Aβ)比未修飾的淀粉樣肽聚集速度更快,并且會形成毒性寡聚物,可能會損傷神經元。最近的研究將pGlu-Aβ與阿爾茨海默病聯系起來,因為它是淀粉樣斑塊的主要成分之一。
焦谷氨酸可以在谷氨酰胺或谷氨酸自發轉化為焦谷氨酸時形成。然而,在谷氨酰胺環化酶(QC)的存在下,這種環化反應速率會顯著增加,谷氨酰胺環化酶也被稱為谷氨酰胺肽環轉移酶(QPCT)。人類谷氨酰胺環化酶已從神經組織中分離出來,并在腦脊液和唾液中被檢測到。
SensoLyte綠色谷氨酰胺環化酶活性檢測試劑盒提供了一種便捷的兩步均相程序,用于使用綠色熒光底物測量來自各種來源的酶活性。在第一步中,底物與谷氨酰胺環化酶或含酶樣本一起孵育,并轉化為焦谷氨酸形式。在第二步中,加入谷氨酰胺環化酶顯色劑以去除pGlu殘基并生成綠色熒光團。該熒光團可以在490 nm激發波長和520 nm發射波長下被檢測到。產生的熒光強度與酶活性成正比。該試劑盒非常適合用于高通量篩選(HTS)谷氨酰胺環化酶激活劑和抑制劑。綠色熒光團的長波長受細胞成分和測試化合物自身熒光的干擾較小。檢測靈敏度為1.5 ng/mL的活性酶。
艾美捷AnaSpec-SensoLyte綠色谷氨酰胺環化酶活性檢測試劑盒(#AS-72230)成分:
成分A:谷氨酰胺環化酶綠色底物:DMSO中的0.5 mM,50 µL
成分B:焦谷氨酸熒光底物標準品:DMSO中的0.5 mM,15 µL
成分C:谷氨酰胺環化酶(人重組):50 µg/mL,10 µL
成分D:谷氨酰胺環化酶顯色劑,250倍濃縮:25 µL
成分E:檢測緩沖液:30 mL
成分F:谷氨酰胺環化酶抑制劑(1-芐基咪唑):DMSO中的1 M,75 µL
特性:
吸收波長(nm):490
發射波長(nm):520
儲存條件:將成分C和D儲存于-80°C。將其他所有成分儲存于-20°C。成分E可在室溫下儲存以便于使用。保護成分A和B免受光照和潮濕。
活性:
應用:FRET(熒光共振能量轉移)、蛋白酶活性檢測
生物標志物靶點:谷氨酰胺環化酶
檢測方法:熒光法
檢測限:1.5 ng/mL
研究領域:
細胞生物學與蛋白質分析
神經科學
子分類研究領域:
阿爾茨海默病
用途:僅限研究使用
來源:
宿主
大腸桿菌(E. coli)和桿狀病毒(Sf 21)衍生
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艾美捷科技是AnaSpec的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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