Biotium的DNA凝膠提取試劑盒是一種基于硅膠旋轉柱的DNA提取試劑盒用于從TAE中的瓊脂糖凝膠中純化40bp-40kb DNA片段的試劑盒或TBE緩沖器。每個柱的最大結合能力為10微克DNA。Biotium的DNA凝膠提取試劑盒與GelRed和GelGreen核酸凝膠染色劑,以及其他常用的核酸凝膠污漬。純化的DNA與常見的下游應用兼容例如轉化、測序、PCR和限制性消化。
艾美捷Biotium-DNA凝膠提取試劑盒(31030)組成:
儲存和搬運:
將試劑盒儲存在室溫下。套件組件自日期起穩定一年按照建議存儲時收到s據。結合緩沖液含有離液硫氰酸胍鹽,具有刺激性。使用手套和其他合適的使用此試劑盒時的實驗室保護。漂白劑與硫氰酸胍混合會產生有害的副產品。請勿將凝膠提取試劑盒中的廢物與漂白劑。
檢測協議:
在使用前,請確保向洗滌緩沖液濃縮液中加入100%未變性乙醇。對于31030-50,向10 mL洗滌緩沖液濃縮液中加入40 mL乙醇。對于31030-250,向55 mL洗滌緩沖液濃縮液中加入220 mL乙醇。離心步驟應在常規臺式微量離心機中以17,900 x g(大約10,000 rpm)進行。
1. 使用干凈的鋒利工具,如手術刀,切除含有感興趣DNA片段的瓊脂糖凝膠切片。稱量凝膠切片,記錄重量,并將凝膠切片轉移到1.7 mL微量離心管中。
2. 向1體積的凝膠切片中加入3體積的結合緩沖液(100 mg大約等于100 μL)。
3. 在50°C下孵化凝膠切片和結合緩沖液10分鐘,或直到凝膠切片w全溶解。在此孵化過程中偶爾漩渦混合將加速溶解過程。
4. 在凝膠w全溶解后檢查溶液的顏色。如果是黃色,溶液的pH值適合DNA結合到柱子上。然而,如果溶液呈橙色、紅色或紫色,只需向溶液中加入少量3 M醋酸鈉pH 5.0,直到顏色恢復為黃色。
5. 為了更有效地回收小于500 bp或大于4 kb的片段,向管中加入1體積的異丙醇并混合。
6. 將樣品吸入提供的柱子中,放入收集管中,離心1分鐘。如果有多余的樣品,只需分幾輪處理,確保將額外的樣品應用到相應的柱子上。
7. 丟棄流穿液,并將現在含有結合DNA的柱子放回收集管中。
8. 向柱子中加入750 μL洗滌緩沖液(確保已加入乙醇),并離心1分鐘。
9. 丟棄流穿液,將柱子放回收集管中。再離心1-5分鐘以去除柱子中殘留的乙醇。
10. 小心地取下柱子,放入干凈的1.5 mL微量離心管中。
11. 向柱子中心加入30-50 μL洗脫緩沖液。孵化1分鐘,然后離心1分鐘以收集純化后的DNA。
12. 將洗脫的DNA儲存在-20°C。
Biotium-DNA凝膠提取試劑盒相關產品:
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Biotium致力于開發和生產用于生物醫學研究的熒光指示劑及其他特殊生化產品。其產品被廣泛應用于細胞生 物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液流動檢測及大規模藥物篩選等眾多領域。艾美捷科技是Biotium的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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