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Arthrogen-CIA:致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒實驗步驟

時間:2024/10/16閱讀:117
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小鼠抗II型膠原5克隆單克隆抗體雞尾酒試劑盒,配有大腸桿菌O111:B4的內毒素(LPS)。

 

艾美捷Arthrogen-CIA:致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg:

貨號:53010

應用:用于小鼠膠原抗體誘導性關節炎(CAIA)。

規格:

雞尾酒:10 mg/ml x 1 ml

LPS:0.5 mg/ml x 1.5 ml

形式:一種溶解在0.05M磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)中的5種單克隆抗體的混合物,識別多種II型膠原的保守表位:克隆A2-10(IgG2a)、F10-21(IgG2a)、D8-6(IgG2a)、D1-2G(IgG2b)和D2-112(IgG2b)。克隆A2-10、D1-2G和D2-112識別CB11片段(124-402)中167氨基酸肽片段LyC1(124-290)內的個別表位。克隆F10-21和D8-6識別CB11片段中的83氨基酸肽片段LyC2(291-374)內的表位。

來源:小鼠

交叉反應性:對大多數II型膠原物種(包括小鼠、豬、雞*、牛、人、鼠、猴、兔、馬和狗)有交叉反應。

D2-112不與雞II型膠原交叉反應。

動物:7-8周齡或更大的高反應小鼠:DBA/1、Balb/c、B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv。

低反應小鼠:C57BL/6或C57BL/6背景。對CAIA的敏感性可能因小鼠供應商和設施而異。強烈建議使用特定病原體陰性(SPF)飼養條件,而不是常規飼養條件,因為細菌污染可能會降低動物的免疫反應,導致關節炎減弱。因此,建議在進行大規模研究之前先進行小規模的初步研究。

使用:建議通過靜脈注射(即尾靜脈)給藥單克隆抗體雞尾酒;不過,也可以使用腹腔注射(IP)。此外,如果不希望使用LPS,請注意關節炎的嚴重程度往往較低。

儲存條件:-80°C

穩定性:2年

注意事項:

LPS是一種常見的細菌毒素,是免疫系統的強效刺激物。推薦的Arthrogen-CIA®雞尾酒協議利用LPS注射來觸發快速出現的重度關節炎,伴隨亞關節炎劑量的抗體。LPS的最佳劑量可能因小鼠品系、動物供應商和飼養條件而異。高劑量的LPS可能對實驗動物致命,甚至50 μg/只,具體取決于動物的條件。因此,Chondrex, Inc.建議首先進行無抗體給藥的初步研究,以優化LPS劑量(50 μg、25 μg和可能的10 μg,分別測試每個劑量并使用多只小鼠),然后再進行大規模CAIA研究。

 

Arthrogen-CIA:致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg實驗步驟:

A. 在CAIA易感小鼠(DBA/1、Balb/c、B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv)中用單克隆抗體雞尾酒和LPS誘導關節炎

第0天:通過靜脈或腹腔注射1.5 mg的5克隆雞尾酒。

第3天:通過腹腔注射25-50 μg的LPS。

注意:在第3-4天觀察到中度至重度關節炎,約在第7-10天達到高峰。

 

B. 在CAIA低反應小鼠(C57BL/6或C57BL/6背景)中用單克隆抗體雞尾酒和LPS誘導關節炎

第0天:通過靜脈或腹腔注射5 mg的5克隆雞尾酒。

第3天:通過腹腔注射25-50 μg的LPS。

注意:在第3-4天觀察到中度至重度關節炎,約在第7-10天達到高峰。第10-14天注射LPS可用于重新刺激炎癥性關節炎。

 

C. 在DBA/1和Balb/c小鼠中用不含LPS的單克隆抗體雞尾酒誘導關節炎

第0天:通過靜脈注射6-10 mg的5克隆雞尾酒。

注意:在第2-3天可觀察到關節炎。該協議尚未在其他CAIA易感小鼠品系(如B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv小鼠)中確認。

 

Arthrogen-CIA:致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg文獻參考:

K. Terato et al. J. Immunol. 148: 2103-2108 (1992)

K. Terato et al. Autoimmunity 22: 137-147 (1995)

S. Yoshino et al. J. Immunol Methods 343: 49-55 (2009)


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