LysA™通用PARylation檢測試劑盒是一種基于夾心ELISA的試劑盒,旨在測量和量化細胞提取物中存在的總聚ADP核糖基化量。該試劑盒采用方便的96孔格式,包含所需的所有試劑,包括標準桿數標準,該標準允許建立定量測量的標準曲線。它含有足夠的抗體、阻斷緩沖液和檢測試劑,以96孔板的形式測量細胞提取物中的PARylation水平。它還包括細胞裂解物作為測定性能的對照。
注:該測定僅適用于聚ADP核糖基化檢測。該測定在100 pM至20 nM的PARylation范圍內呈線性。
圖1:LysA™通用PARylation檢測工作流程圖
使用抗PAR抗體來涂覆96細胞板。來自細胞的裂解物被添加到包被的孔中,因此存在于細胞裂解物中的標準桿數(PARylated proteins)被抗體捕獲。隨后用抗PAR一級抗體和二級HRP-標記抗體孵育。添加化學發光的HRP底物提供了發光信號,其與細胞提取物中存在的標準桿數的量直接相關
艾美捷LysA™通用PARylation檢測試劑盒:
貨號:82123
檢測試劑盒格式:化學發光
物種:人類
需要但不提供的物料:
改良RIPA裂解緩沖液(中等強度)(BPS Bioscience #82126)
LysA™蛋白酶抑制劑雞尾酒試劑盒(BPS Bioscience #82199)
ADP-核糖基化循環抑制劑混合物(BPS Bioscience #82130)
儲存/穩定性:
如果按照指示儲存物料,這個檢測試劑盒在收到日期起的6個月內將表現最佳。
應用:
量化培養細胞中PAR的總水平。
在培養細胞中篩選或確定PARP或PARG抑制劑的IC50。
在細胞模型中驗證PARP或PARG抑制劑。
運輸溫度 -80°C
禁忌癥:
這個檢測不允許檢測蛋白質上的單(ADP-核糖基)(MAR)修飾。
避免使用SDS或其他濃度大于0.1%的強變性洗滌劑。
這個檢測與最多2% v/v的總洗滌劑和最多1% DMSO兼容。
避免使用濃度大于10 mM的疊氮鈉和還原劑,如二硫蘇糖醇或β-巰基乙醇。
科學類別:癌癥治療靶點
僅限研究使用
LysA™通用PARylation檢測試劑盒文獻參考:
Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.
James D. I., et al., 2016 ACS Chem Biol 11 (11): 3179-3190.
Drown B. S., et al., 2018 Cell Chem Bio 25 (12): 1562-1570.
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