土壤中的微生物資源非常豐富,但用傳統技術培養的微生物僅占微生物總數的0.01%~10%,且大部分微生物處于不可培養的狀態,使相當多的菌種不能被充分地開發和利用。從土壤中提取的DNA,是微生物、動植物遺丨體等的總DNA。
由于土壤微生物成分復雜,常規提取總DNA的方法難以去除腐殖酸,而腐殖酸會抑制聚合酶鏈式反應(PCR)擴增中的TaqDNA聚合酶以及酶切反應的限制性內切酶活性。另外,土壤質地和成分的差異也會影響土壤微生物DNA的提取效果。因而,從土壤中提取DNA,腐殖物質等抑制因子的去除就成為了重中之重。
如何從土壤樣本中提取純化DNA?Norgen土壤DNA分離試劑盒為從土壤樣本中檢測微生物提供了一種方便、快速的方法。所有類型的土壤樣品均可使用該工具包進行處理,包括普通土壤樣品和腐殖酸含量高的難處理土壤樣品,如堆肥和糞便。該試劑盒使用提供的OSR(有機物去除)溶液去除所有微量腐殖酸和PCR抑制劑。然后使用一種簡單快速的旋轉柱程序進一步純化DNA。總基因組DNA可以從土壤中發現的各種微生物中分離和純化,如細菌、真菌和藻類。純化的DNA質量zui高,與下游PCR應用*兼容,因為在分離過程中去除了所有腐殖酸物質和PCR抑制劑。
該土壤DNA分離試劑盒具有以下特點:
1.快速簡便的土壤樣品中微生物檢測方法;
2.處理所有土壤類型,包括常見的土壤樣品和腐植酸含量高的難處理的土壤樣品,如堆肥和糞肥;
3.使用OSR(Organic Substance Removal)溶液去除有機物質;
4.從DNA樣本中去除所有腐殖酸;
5.使用快速離心柱形式進行快速簡便的處理;
6.從包括細菌、真菌和藻類在內的各種微生物中分離出高質量的總DNA;
7.純化的DNA質量很高,*兼容下游PCR應用,因為在分離過程中去除了腐殖酸物質和PCR抑制劑。
從表層土壤和粘土樣品中分離出的DNA濃度比較。Norgen土壤DNA提取試劑盒和 Competitor M的試劑盒用于從250 mg表層土壤和粘土樣品中分離 DNA。與競品相比,Norgen試劑盒顯示兩種樣品的DNA濃度更高。
土壤DNA提取試劑盒操作流程圖
土壤DNA提取試劑盒(#64000)精彩文章鑒賞:
1.Bioremediation of high organic load lagoon sediments: compost addition and priming effects. Chemosphere. 2013.
2.Insertion/deletion-based approach for the detection of Escherichia coli O157:H7 in freshwater environments.Environmental Science & Technology.2014
Norgen Biotek成立于1998年,是一家著名全球化生物技術公司,其生產基于磚利技術的核酸和蛋白質純化及富集產品用于研究和診斷。艾美捷科技是Norgen的中國代理商,為您提供優質的土壤DNA分離試劑盒。
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