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“點(diǎn)擊化學(xué)"的基本思想就是利用碳-雜原子成鍵反應(yīng)快速實(shí)現(xiàn)分子多樣性,一般由疊氮化物(azide)和炔烴(alkyne)作用形共價(jià)鍵,具有高效穩(wěn)定,高特異性等優(yōu)點(diǎn)。反應(yīng)不受PH影響,能在常溫條件下的水中進(jìn)行,甚至能在活細(xì)胞中進(jìn)行。
根據(jù)引入基團(tuán)的種類,點(diǎn)擊化學(xué)試劑可以分為以下幾種:
一、疊氮修飾試劑
1.AmdU(5-疊氮甲基-2'-脫氧尿苷)
疊氮基甲基脫氧尿苷(AmdU)是一種含有疊氮化物的核苷,可通過細(xì)胞聚合酶摻入新生DNA中。隨后可以用炔烴或環(huán)炔烴修飾以此方式連接到DNA的疊氮基團(tuán)。
2.疊氮化物-PEG2-醛
具有疊氮基和脂族醛部分的連接基。
3.疊氮化物-PEG3-OH
疊氮化物PEG3 OH是一種雙官能分子,具有疊氮基,伯醇和介于兩者之間的親水性連接基。
4.疊氮丁酸NHS酯
用于肽和蛋白質(zhì)的疊氮基標(biāo)記的活化酯
5.生物素PEG3疊氮化物
疊氮化生物素親和探針可利用生物素進(jìn)行點(diǎn)擊化學(xué)標(biāo)記。
6.氯-PEG3-疊氮化物
氯-PEG3-疊氮化物是帶有反應(yīng)性氯化物的異雙功能連接子,用于各種親核基團(tuán)的烷基化
7.碘-PEG3-疊氮化物
碘-PEG3-疊氮化物包含高反應(yīng)性的碘化物官能團(tuán),其可以使各種以C-,O-,N-,S-為中心的親核試劑和其他親核試劑烷基化。
二、炔基修飾試劑
1.乙炔酰肼
含有炔基和酰肼功能的雙功能試劑。它與醛和酮反應(yīng)。然后可以通過CuAAC反應(yīng)將炔基與各種疊氮化物偶聯(lián)。
2.炔烴馬來酰亞胺
馬來酰亞胺試劑,用于將炔烴官能團(tuán)連接到蛋白質(zhì),肽和帶有SH(硫醇)基團(tuán)的其他分子,包括半胱氨酸殘基。
3.炔烴NHS酯(己酸NHS酯)
炔烴NHS酯用于帶有炔基的生物分子標(biāo)記,用于銅催化的Click化學(xué)。
4.生物素炔烴
生物素炔烴是一種反應(yīng)性親和標(biāo)記,可以通過點(diǎn)擊化學(xué)(Click Chemistry)附著到生物分子上。
5.DBCO NHS酯
偶氮苯并環(huán)辛炔(DBCO,ADIBO)試劑,用于應(yīng)變促進(jìn)的無銅Click化學(xué)(spAAC)。該試劑具有NHS酯功能,可將環(huán)辛炔連接到各種分子上。
6.EdU(5-乙炔基-2'-脫氧尿苷)
EdU是一種核苷,可通過細(xì)胞酶摻入復(fù)制的DNA中。之后,可以通過與熒光染料疊氮化物的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)來開發(fā)細(xì)胞中包含的DNA,從而揭示細(xì)胞增殖。
7.己酸STP酯
炔基活化酯,用于修飾氨基。STP酯基是NHS酯官能團(tuán)的替代品。
8.戊酸STP酯
一種用于將炔烴引入肽/蛋白質(zhì)的活化酯。
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