B細(xì)胞的分化過(guò)程主要可分為前B細(xì)胞（Pre-B cell）、不成熟B細(xì)胞(immature B cell)、成熟B細(xì)胞(mature B cell)、活化B細(xì)胞(activated B cell)和漿細(xì)胞(plasma cell)五個(gè)階段。

B細(xì)胞分化的各個(gè)階段可以通過(guò)評(píng)估不同的細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)和水平來(lái)確定，這些標(biāo)志物的表達(dá)和水平在B細(xì)胞分化的整個(gè)過(guò)程中都受到調(diào)節(jié)。前B細(xì)胞胞漿中可檢測(cè)到IgM的重鏈u鏈，但無(wú)輕鏈，也無(wú)膜表面Ig的表達(dá)，因此缺乏對(duì)抗原的反應(yīng)能力。末端脫氧核甘酸轉(zhuǎn)移酶（terminal deoxy nucleotidyl transferase TdT）以及CD10可表達(dá)在前B細(xì)胞，進(jìn)入非成熟B細(xì)胞后這兩種標(biāo)志即消失，因此TdT和CD10對(duì)于區(qū)分前B細(xì)胞與B細(xì)胞其它發(fā)育階段非常有用。CD19、CD20和MHCI類抗原在此階段開(kāi)始表達(dá)。

前B細(xì)胞對(duì)抗原無(wú)應(yīng)答能力；不成熟B細(xì)胞開(kāi)始表達(dá)mIgM，但如與抗原結(jié)合，則產(chǎn)生負(fù)應(yīng)答，使B細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槭芤种茽顟B(tài)，不能繼續(xù)分化為成熟的B細(xì)胞，這是形成自身免疫耐受的機(jī)制之一，CD19、CD20和MHCI類抗原表達(dá)量增加，并可開(kāi)始表達(dá)CD21抗原；骨髓中發(fā)育成熟B細(xì)胞經(jīng)丨血液遷移至外周淋巴器官，此時(shí)膜表面同時(shí)表達(dá)mIgM和mIgD，mIgD的表達(dá)防止了B細(xì)胞與抗原結(jié)合后所引起的免疫耐受；成熟B細(xì)胞接受抗原刺激后，在抗原提呈細(xì)胞和Th細(xì)胞的輔助下成為活化B細(xì)胞，進(jìn)而分化為漿細(xì)胞，合成和分泌各類免疫球蛋白，同時(shí)獲得了PC-1等漿細(xì)胞特異性標(biāo)志，而mIg，MHCI類抗原、CD19、CD20、CD21等標(biāo)記消失。

由此可知，B細(xì)胞及其分化亞群可以根據(jù)細(xì)胞表面表達(dá)的不同標(biāo)志物而區(qū)分。選擇這些結(jié)合了熒光的抗體直接標(biāo)記這些標(biāo)志物之后，就可以通過(guò)多色流式分析技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)抗體分泌B細(xì)胞的篩選。

EXBIO分泌抗體B細(xì)胞篩選試劑盒，基于不同熒光標(biāo)記的抗體CD45/IgD/CD27/CD24/CD19/CD21/CD38對(duì)EDTA抗凝人血中的抗體分泌B細(xì)胞亞群進(jìn)行免疫表型分析。

結(jié)果分析：

需要住院的COVID 19患者中免疫細(xì)胞頻率動(dòng)力學(xué)的事例。

上圖設(shè)門分析顯示了用于鑒定患者外周全血中抗體分泌細(xì)胞（ASC）亞群；下圖顯示了患者住院期間幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的細(xì)胞頻率（占B細(xì)胞的百分比）。

流式細(xì)胞術(shù)表型鑒定正常人外周血全血中的抗體分泌細(xì)胞（ASC）的策略：

1.單重態(tài)細(xì)胞

2.白細(xì)胞

3.單核細(xì)胞

4.CD19 + B淋巴細(xì)胞

5.CD19 + CD27 +記憶B淋巴細(xì)胞

6.CD19 + CD27 + CD38 +抗體分泌細(xì)胞

7.IgD +非轉(zhuǎn)換和IgD-級(jí)轉(zhuǎn)換的成漿細(xì)胞

使用ED7704 抗體分泌B細(xì)胞篩選試劑盒在正常人外周血中對(duì)循環(huán)的抗體分泌細(xì)胞（CD19 + CD27 + CD38 +漿母細(xì)胞）進(jìn)行流式細(xì)胞儀表面染色。

顯示了每個(gè)目標(biāo)人群的頻率（B細(xì)胞的百分比）。

文章來(lái)源：艾美捷科技