Tubulin porcine brain，T240-DX——微管蛋白（豬腦， 純度>99%）采用Shelanski等人的方法從豬腦中純化出微管蛋白，并用陽離子交換層析進一步純化到99%以上的純度。白色凍干粉供應。

一、Tubulin porcine brain的用途

主要表現在五個方面：

1.抗微管蛋白配體的IC50和EC50測定；

2.微管結合研究；

3.微管蛋白單體結合研究；

4.HDAC6研究；

5.微管激活的運動蛋白atp酶分析。

二、Tubulin porcine brain的材料組成

采用Shelanski等人的方法從豬腦中純化出微管蛋白，并用陽離子交換層析進一步純化到99%以上的純度。白色凍干粉供應。

該產品具有*的聚合活性，采用zhuanli技術進行凍干以提高穩定性和使用壽命。T240在4°C干燥條件下穩定1年。如果您的項目需要相同批次的微管蛋白以獲得一致的結果，強烈建議您批量購買該產品，以節省時間和金錢。本品可替代我們的高純度牛微管蛋白產品（Cat。#TL238、T238和T237），并以相同的方式工作。

三、Tubulin porcine brain的純度

通過SDS-PAGE凝膠上的蛋白質掃描密度測定。樣品純度>99%。

四、Tubulin porcine brain的生物活性

微管蛋白的一個單位定義為5.0 mg純化蛋白（由精密紅色高級蛋白分析試劑cat測定）。#ADV02）。通過微管蛋白聚合試驗評估T240的生物活性。微管蛋白聚合成微管的能力可以通過觀察340nm處微管蛋白溶液的光密度增加來觀察。當使用分光光度計路徑長度為0.8 cm（1/2面積96孔板中的樣品體積為180µl）時，一般微管蛋白緩沖液中的5 mg/ml微管蛋白溶液加上5%甘油和1 mM GTP，應在30分鐘內獲得0.75-1.10的OD340 nm讀數。

需要注意的是，微管蛋白減去甘油在G-PEM緩沖液中不會聚合，直到微管蛋白濃度非常高（>10 mg/ml）。即使在這些濃度下，聚合也相對緩慢。在低濃度微管蛋白-甘油的情況下，可通過添加聚合促進化合物（例如甘油、紫杉醇或二甲基亞砜）實現高效聚合。

五、關于微管蛋白的兩個問題

Q1：儲存微管蛋白以確保穩定性和活性的正確方法是什么？

A：微管蛋白凍干產品的建議儲存條件為4°C，并添加干燥劑，以保持濕度小于10%的濕度。在這些條件下，蛋白質可以穩定6個月。凍干蛋白質也可以在-70°C下干燥保存，在那里它可以穩定6個月。但是，在-70°C時，管蓋上的橡膠密封件可能會破裂并進入濕氣。因此，我們建議在4°C下儲存。如果在-70°C下儲存，如果使用這種儲存條件，則必須在凍干蛋白質中加入干燥劑。按照指示重組蛋白質后，應將G-PEM緩沖液中的濃縮蛋白質等份，在液氮中快速冷凍，并在-70°C下儲存（穩定6個月）。注：在液氮中快速冷凍微管蛋白是非常重要的，因為其他冷凍方法會導致活性顯著降低。在室溫水浴中快速解凍1分鐘。避免反復凍融循環。

Q2：為什么細胞骨架推薦使用普通微管蛋白緩沖液和GTP來恢復微管蛋白？

A：為了維持微管蛋白和微管蛋白的構象，我們推薦使用GTP+tubulin單體。對于再懸浮，我們建議使用普通微管蛋白緩沖液（Cat。#BST01-001），包括80 mM管道，2 mM MgCl2，1 mM EGTA，pH 7.0，補充1 mM GTP（Cat。#BST06-001）。微管蛋白需要GTP和鎂離子來維持適當的穩定性和構象，即使是單體狀態。聚合過程中還需要GTP，因為它在微管蛋白聚合過程中的水解是發生聚合所必需的。EGTA是鈣的螯合劑，是微管蛋白聚合的有效抑制劑。甘油通常被添加到5-10%的濃度，以增強聚合；然而，甘油不是維持生物活性微管蛋白所必需的，在重組和儲存微管蛋白時也不需要包含甘油。在對重組微管蛋白進行分批儲存時，必須在濃度大于6 mg/ml的液氮中對微管蛋白進行等分和快速冷凍，以保持微管蛋白的生物活性。然后，應將等分試樣儲存在-70°C下。解凍等分試樣時，應在室溫水浴中快速解凍，并將其放在冰上，直到試驗使用之前。

艾美捷Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品，尤其以細胞骨架相關研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現有產品的藥物篩選服務。