賽默飛分子熒光光譜是一種定性、定量分析的儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化從而闡明分子結構與功能之間的關系。
關于賽默飛分子熒光光譜躍遷的兩種方式:
1、輻射躍遷
磷光:
①若第一激發單重態的分子通過系間竄躍到達第一激發三重態,再通過振動馳豫轉至該激發的較低振動能級,然后以輻射的形式回到基態,發出的光線稱為磷光。
②由于激發三重態能量較激發單重態低,所以磷光的波長比熒光的波長稍長。
③磷光僅在很低的溫度或黏性介質中才能觀測到。因此磷光很少應用于分析。
2、無輻射躍遷
①振動弛豫:
由于分子間的碰撞,激發態分子由同一電子能級中的較高振動能級轉至較低振動能級的過程,其效率較高。激發態分子常常首先發生振動馳豫。
②內轉換:
相同多重態的兩個電子能級間,電子由高能級回到低能級的分子內過程。
③系間竄越:
激發態分子的電子自旋發生倒轉而使分子的多重態發生變化的過程。含有重原子的分子中,系間竄躍最常見。
④外轉換:
激發態分子與溶劑或其他溶質相互作用和能量轉換而使熒光(或磷光)減弱甚至消失的過程。
熒光強度的減弱或消失,稱為熒光熄滅或猝滅。
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