色譜柱沖洗&預平衡
國產液相色譜柱的平衡與維護
國產液相色譜柱的平衡與維護
國產液相色譜柱是運用于色譜儀系統中起著分離作用的儀器,是色譜儀分析系統的核心部件,色譜柱柱效的高低影響著檢測速率的快慢以及檢測結果的準確性。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快。色譜柱的性質、填充料、柱長、固定相和流動相的種類等都是影響色譜柱柱效的因素。因此,為了提高色譜柱的柱效,保證液相色譜儀分析檢測的靈敏性,了解液相色譜柱的結構性能尤為重要。
1.國產液相色譜柱的平衡
色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,就會在處理問題方面獲得zui大的"補償",而且色譜柱的壽命也會變得更長。
操作步驟:
①平衡開始時將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)。
②如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡;分析結束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。
2.國產液相色譜柱的維護
①使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)。
②大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍。
③避免流動相組成及極性的劇烈變化。
④流動相使用前必須經脫氣和過濾處理。
⑤如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中。
⑥氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。