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關于國產(chǎn)液相色譜柱的再生處理技巧
關于國產(chǎn)液相色譜柱的再生處理技巧
1.常規(guī)處理
硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱每一次用完后用低流速長時間的二氯甲烷或正己烷等溶劑沖洗；鍵合相硅膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱先用蒸餾水沖洗，再用甲醇沖洗，然后用甲醇與蒸餾水以一定比例混合的溶液沖洗后過夜。
對于已使用一段時間后柱效下降的色譜柱可按以下方法進行再生。再生處理包括活化和凈化兩種。
硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱按下列順序沖洗：
3甲基戊烷或己烷-3氯乙烷-乙酸乙脂-丙酮-乙醇-水。
鍵合相硅膠柱：
蒸餾水-甲醇。
離子交換樹脂柱：
高濃度的NaCl溶液可使大部分樹脂再生，油脂等少數(shù)與樹脂緊密結合的物質可用低濃度堿溶液沖洗，酸性有機物吸附在固定相的用低pH緩沖液沖洗，堿性有機物用高pH緩沖液沖洗，然后再用蒸餾水-甲醇-二氯甲烷-甲醇-蒸餾水沖洗。
凝膠色譜柱：
由于凝膠色譜柱是根據(jù)被分離物質的分子量大小而分離物質，通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑沖洗可除去大部分的結合物質，如果一些污染物仍然不能清除時，用24%或30%乙腈沖洗過夜可除去疏水蛋白，用30%-50%乙酸可除去親水蛋白，用蛋白水解酶處理可分解凝膠中剩余的痕量胃蛋白酶，然后再用蒸餾水-甲醇-蒸餾水沖洗。
已污染的國產(chǎn)液相色譜柱處理：
因保留強的物質污染，流動相或樣品中不溶物沉積于柱頭，可用下列方法洗滌：去除脂類可用四氫呋喃、乙腈或甲醇洗滌；去除蛋白質可用乙腈、丙醇和1%3Cl乙酸進行梯度洗脫；一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脫，同時反復注入100-200ml的四氫呋喃。