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CELL-WISE 293 培養(yǎng)基 CW001 產(chǎn)品介紹(2025 年更新)
產(chǎn)品概述
貨號(hào):CW001
適用場(chǎng)景:作為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)基,特別適用于 HEK293 細(xì)胞的高密度懸浮培養(yǎng)。
成分特性:無(wú)蛋白、無(wú)動(dòng)物源,且化學(xué)成分限定,為細(xì)胞培養(yǎng)提供安全穩(wěn)定的環(huán)境。
使用便利性:屬于即用型培養(yǎng)基,無(wú)需添加額外成分,開(kāi)箱即可投入使用。
參數(shù)規(guī)格
外觀(guān):呈現(xiàn)澄清透明的紅色液體。
滲透壓:275±15 mOSM。
pH 值:處于 6.9 - 7.4 的適宜范圍。
無(wú)菌檢測(cè):經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè),確認(rèn)無(wú)菌。
內(nèi)毒素:含量低于 5 EU/mL。
儲(chǔ)存條件:需在 2 - 8℃環(huán)境下,避光保存。
效期:保質(zhì)期為 12 個(gè)月。
產(chǎn)品用途
本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究,嚴(yán)禁用于人類(lèi)或動(dòng)物的診斷和治療。
使用方法
細(xì)胞馴化
直接馴化
多數(shù)情況下,培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細(xì)胞,可直接適應(yīng) Balance CD 293 medium。只需按照日常傳代方式(稀釋?zhuān)└鼡Q培養(yǎng)基即可完成馴化。
漸進(jìn)式馴化
注意:務(wù)必選用低代次、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行馴化。
在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞,并使用該培養(yǎng)基連續(xù)傳代 2 至 3 次,直至細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 2x10? cells/ml 后進(jìn)行傳代,傳代時(shí)細(xì)胞密度控制在 0.5 - 0.6×10? cells/mL,此時(shí) 5 - 10% 血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與 Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為 75:25。
2. 將細(xì)胞放置于 37℃、5% CO?、轉(zhuǎn)速為 110 - 175 rpm 的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)。
3. 3 - 4 天后,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 3x10? cells/ml 且細(xì)胞活率 > 90% 時(shí),傳代時(shí)調(diào)整 5 - 10% 血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與 Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為 50:50,細(xì)胞密度控制在 0.5×10? cells/mL。若細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,可離心上清,保留 20% 條件培養(yǎng)基,再加入 80% 的 5 - 10% 血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為 75:25 的混合培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 重復(fù)步驟 3,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基所占比例(5 - 10% 血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無(wú)血清培養(yǎng)基與 Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例從 25:75 調(diào)整至 10:90),直至使用 100% 的 Balance CD 293 培養(yǎng)基。
5. 經(jīng)過(guò)在 100% 的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng),傳代后 3 - 4 天細(xì)胞密度若能達(dá)到 2 - 3×10? cells/mL,且細(xì)胞活率大于 90%,則表明細(xì)胞已適應(yīng) Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,一般傳代 2 - 3 次后,即可進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
注意:一般在細(xì)胞馴化過(guò)程中,前三代細(xì)胞狀態(tài)可能欠佳,但從第四代起,細(xì)胞狀態(tài)通常會(huì)有所改善。
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