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LNCap人前列腺癌細胞

參   考   價: 1200

訂  貨  量: ≥1 瓶

具體成交價以合同協議為準

產品型號YKLLNCap

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地北京市

更新時間:2024-04-30 17:12:31瀏覽次數:1603次

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供貨周期 一周 規格 1個T25瓶
貨號 YKLLNCap
LNCap人前列腺癌細胞介紹:
種屬:人;貼壁生長;生長周期:3~4天
人前列腺癌細胞LNCaP Clone FGC,是1977年從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離的,當時該患者已確診為轉移性前列腺癌。根據報道,該細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節并生成酸性磷酸酶ACP)有響應。

LNCap人前列腺癌細胞介紹:

種屬:人;貼壁生長;生長周期:3~4天

細胞傳代方法:1:2傳代。

細胞形態特性:上皮樣;梭形。

有一些細胞是數量多一點比較好生長,生長狀態也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數量少一點細胞狀態會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態不好,(或者細胞形態不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:

先倒掉舊的培養基,加入3ml新的培養基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養瓶內,培養瓶事先加入培養基,放入培養箱內培養,按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養基,加入3ml新培養基再輕輕洗一次。然后加入培養基培養。后續觀察細胞生長情況以及形態。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。

Lncap Cell細胞背景資料:該細胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結細針穿刺的活體組織中分離建立的。

LNCap人前列腺癌細胞凍存的步驟:

1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天建議換液。將多個培養瓶中的細胞培養液去掉,用0.25%YDBM消化。適時去掉YDBM,加入少量新培養液。用吸管吸取培養液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10鐘);

2)去上清液,加入含20%小牛血清的培養基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5*106~1×107/mL之間。(凍存培養液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養的細胞類型來選擇;

3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數);

4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐)或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;

5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,最好取出一只凍存管細胞復蘇培養,觀察生長情況,然后再繼續凍存。

 

 

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