您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
高效液相色譜法可以檢測(cè)漆樹有效成分
我國(guó)的漆樹種植規(guī)模有多大？我來告訴你答案， 65萬畝種植面積，2億株以上。從漆樹上留下來的生漆是涂料生產(chǎn)的重要原料，素“有涂料王"的美譽(yù)。而漆樹葉的木、皮、枝、葉做成的漆樹提取物也是重要的中藥檢測(cè)種類之一。漆樹提取物中含有的顏木素、漆黃素和硫*素等多酚類化合物，具有抗氧化、抑菌、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗病毒、保護(hù)神經(jīng)和防止神經(jīng)衰老等生物活性。 此外漆樹中的有效成分還可以用于保健食品、化妝品和醫(yī)藥等行業(yè)，漆蠟也是重要的化工原料檢測(cè)種類之一。
一、漆樹行業(yè)分析
從上面我們也可以看出，漆樹屬于那種“混身都是寶"的經(jīng)濟(jì)作物。雖然我國(guó)漆樹種植規(guī)模很大，但是漆樹的資源利用卻十分有限，產(chǎn)品應(yīng)用單一，標(biāo)準(zhǔn)不完善，比如新發(fā)布的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)LY/T3280-2021《漆樹提取物》 甚至還處于尚未實(shí)施階段。相比國(guó)外，漆樹的藥用成分研究動(dòng)力嚴(yán)重不足，難以形成高價(jià)值產(chǎn)業(yè)，不足以形成更加有力的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)點(diǎn)，所以漆樹行業(yè)發(fā)展已經(jīng)到了亟待改善的地步。通過漆樹有效成分分析，可以幫助我們?cè)诳蒲小?生產(chǎn)和開發(fā)應(yīng)用以及外貿(mào)等領(lǐng)域促進(jìn)漆樹資源的高價(jià)值化利用。
二、現(xiàn)有檢測(cè)方法介紹
目前，漆樹的飽和漆酚、單不飽和漆酚、二不飽和漆酚和三不飽和漆酚等成分的檢測(cè)方法主要有高效液相色譜（HPLC）、紅外（IR）、紫外光譜（UV spectrum）、核磁共振（NMR）、薄層層析（TLC）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC/MS）等檢測(cè)手段，漆黃素、黃顏木素、硫*素和紫鉚花素類化合物主要的分析檢測(cè)方法包括紫外分光光度法（UV spectrum、高效液相色譜法（HPLC）、高效液相色譜/質(zhì)譜法（HPLC-MS）和高效毛細(xì)管電泳法等，其中紫外分光光度法和高效液相色譜法最為常用。但是，目前并沒有關(guān)于漆樹中以上主要有效成分的、統(tǒng)一的、快速的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，這也使得行業(yè)中魚龍混雜，無法對(duì)行業(yè)發(fā)展形成良性刺激，從而極大的抑制了漆樹行業(yè)的發(fā)展，阻礙了這些有效成分的進(jìn)一步應(yīng)用。
三、試驗(yàn)方法驗(yàn)證
LY/T3280-2021《漆樹提取物》只提出了漆黃素、黃顏木素、硫*素的檢測(cè)分析方法。該標(biāo)準(zhǔn)中給出的方法是參考的國(guó)標(biāo)GB/T 27579 《精油 高效液相色譜分析 通用法》，利用高效液相色譜-紫外檢測(cè)器和外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。拜恩工程師團(tuán)隊(duì)通過對(duì)該方法的檢測(cè)波長(zhǎng)、 流動(dòng)相系統(tǒng)、 流動(dòng)相洗脫梯度、 進(jìn)樣體積、 流速和柱溫等多方面因素進(jìn)行考察，在參考了相關(guān)碩士、博士的論文和分析數(shù)據(jù)，經(jīng)過驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)并多次調(diào)整后，最終也建議采取高效液相色譜（HPLC）是檢測(cè)漆樹有效成分的最佳方法。
四、高效液相色譜法介紹
1.樣品制備注意事項(xiàng)
a.首先為了防止漆樹樣品中水分對(duì)結(jié)果的影響，并保證其結(jié)構(gòu)不被破壞，提高提取效率，需要將漆樹樣品干燥處理即陰干，使得到的試樣含水率不大于 3%后，用粉碎機(jī)將其粉碎，密閉干燥保存。
b.鑒于不同漆樹樣品中不同有效成分含量的差別，在制定標(biāo)準(zhǔn)曲線的時(shí)候，漆酚標(biāo)準(zhǔn)溶液梯度從 0、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、20.00 μg/mL、40.00 μg/mL、60.00 μg/mL、80.00 μg/mL、100.00 μg/mL、500.00 μg/mL 進(jìn)行配置，黃酮標(biāo)準(zhǔn)溶液梯度從 0、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL、20.00 μg/mL、40.00 μg/mL、60.00μg/mL、80.00 μg/mL、100.00 μg/mL、0.50 mg/mL、1.00 mg/mL、2.00 mg/mL 進(jìn)行配置。該漆樹漆酚試樣溶液的制備方法我們是通過對(duì)其提取溶劑、料液比、浸泡時(shí)間、提取次數(shù)、萃取溶劑的考察及其正交試驗(yàn)得到。
2.試驗(yàn)步驟
精確稱取漆樹樣品 10 g（精確到 0.1 mg）于 500 mL 圓底燒瓶中，加 200 mL 醇常溫下浸泡 3 h，在 50℃下用旋蒸蒸發(fā)儀減壓回收溶劑，所得浸膏用 300mL 氯仿-水（體積比 3:1）溶液萃取 3 次，收集氯仿層，濃縮后，所得漆樹漆酚提取物樣品浸膏用甲醇溶解定容至 50 mL，經(jīng)過 0.22 μm 濾膜過濾，濾液用于高效液相色譜儀測(cè)定.
總結(jié)：首先制備樣品測(cè)試溶液，然后利用高效液相色譜儀檢測(cè)，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品中各漆酚、黃酮的濃度，再將所得結(jié)果進(jìn)行換算，得到最終漆樹樣品中飽和漆酚、單不飽和漆酚、二不飽和漆酚和三不飽和漆酚以及黃顏木素、漆黃素、紫鉚花素和硫*素的含量。
利用高效液相色譜法可以建立統(tǒng)一的快速、準(zhǔn)確、高靈敏的漆樹中主要有效成分含量的測(cè)定方法，將使數(shù)據(jù)具有較強(qiáng)的可比性，成果將為漆樹中主要有效成分涉及的藥品、保健食品相關(guān)行業(yè)、檢測(cè)機(jī)構(gòu)、管理機(jī)構(gòu)的新產(chǎn)品研發(fā)、檢測(cè)和監(jiān)管提供急需的提取分離檢測(cè)的工藝、技術(shù)方法、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)為提升漆樹廢棄物資源高值化利用和相關(guān)產(chǎn)品檢測(cè)水平提供技術(shù)支撐，促進(jìn)林業(yè)資源提質(zhì)增效。同時(shí)解決無高附加值新產(chǎn)品、相關(guān)企業(yè)、從業(yè)者尤其是農(nóng)民種植戶的經(jīng)濟(jì)水平低、經(jīng)濟(jì)效益待提高等問題，對(duì)于可以改變?nèi)藗儗?duì)漆樹的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)，與國(guó)際接軌，具有重要意義，并為漆樹在不同領(lǐng)域的應(yīng)用，提供基礎(chǔ)。