利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒
僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中人利什曼原蟲抗體（Leishimaria Ab）的含量。
有效期：6個月
保存條件：2-8℃

[實驗原理]

試劑盒采用間接法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人利什曼原蟲抗體（Leishimaria Ab）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人利什曼原蟲抗體（Leishimaria Ab）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

[樣本處理及要求]

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織*碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注：標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

[需要而未提供的試劑和器材]

1.酶標儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

4.蒸餾水或去離子水

[試劑盒組成]

利什曼原蟲，一種微小的鞭毛蟲，在動質體目錐體蟲科動物中占據著特殊的地位。這種原蟲主要寄生于哺乳動物、爬行類等動物體內，給宿主帶來一系列健康問題。在醫學領域，利什曼原蟲引發的疾病統稱為利什曼病，其分布廣泛，影響深遠。

利什曼原蟲的種類繁多，其中寄生于人體的主要有三種，其中杜氏利什曼原蟲的危害尤為嚴重。這種原蟲主要寄生于人體的肝、脾、淋巴腺等細胞之內，通過其微小的鞭毛在細胞內移動并繁殖。當人體被感染后，會引發黑熱病，這是一種嚴重的疾病，患者會出現發熱、肝脾腫大、貧血等癥狀。如果不及時治療，死亡率高達90%以上，是我國五大寄生蟲病之一。

利什曼病的傳播主要依賴于特定的媒介，如白蛉子。這些吸血的小昆蟲在吸食了帶有利什曼原蟲的動物血液后，原蟲會在其體內繁殖形成細滴蟲。當白蛉子再次吸食人血時，細滴蟲就會被接種到人體內，使人感染。此外，病犬也是利什曼病的重要傳播源，因此，在疫區，消滅病狗也是預防利什曼病的重要手段之一。

利什曼病在全球范圍內的分布廣泛，主要流行于非洲、亞洲、歐洲南部和南美洲等地。在我國，皮膚利什曼病最早發現于20世紀80年代，新疆和中國臺灣*病例報道，患者以青壯年為多。隨著全球化的推進和氣候變化的影響，利什曼病的傳播范圍也在不斷擴大，對全球公共衛生構成了嚴重威脅。

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