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微生物菌種的保藏方法
閱讀：487 發布時間：2017-8-16由于教學實驗各時期使用的真菌微生物菌種在數量及種類上不盡相同，所以與其相適應的培養方法與保管方式亦不相同。大體上分為定期傳代保存法、超低溫凍結保存法兩種。
1、 定期傳代保存法
(1)液體培養基保存法：單細胞真菌接種于RPMI 1640培養基中,37℃培養24 h，取出后置4℃冰箱保存。該方法用于學期初低溫凍結菌種的復蘇、增菌培養。
(2)瓊脂平板培養基保存法：學期開始，多細胞凍結菌種解凍后，劃線接種于察氏平板培養基上面，28℃培養7～8 d，再將培養菌絡移種于改良馬丁平板培養基上，28℃培養7 d，待培養菌絡生長良好,置4℃冰箱保存。為多細胞真菌的復蘇與鑒定試驗。
(3)瓊脂斜面培養基保存法：單細胞真菌由液體培養基中多細胞真菌從馬丁培養基表面，分別挑取菌種菌絡，蜿蜒化線接種于各自相對應的瓊脂斜面培養基中,經37℃或28℃培養生長良好后，置4℃冰箱保存備用。該方法用于學期中，真菌菌種即將使用，實驗課前的菌種純化和制備階段。
(4)液體石蠟覆蓋保存法：將無菌液體石蠟油覆蓋于菌絡生長良好的瓊脂斜面真菌培養物表面，厚度約1 cm左右，置4℃冰箱保存。該法用于學期末對真菌菌種較長時期的保存方法。
2、 液氮超低溫凍結保存法
將單細胞或多細胞真菌培養物,以無菌生理鹽水洗下并計數，加入等量脫脂牛奶保護劑，分裝進安瓿后封口。選擇菌種不同的適宜冷卻速度，使瓿內菌懸液急速或慢速凍結成冰。置液氮超低溫下保存。
各菌種保存方法結果分析：
(1)液體培養基保存法，可保存單細胞真菌15 d左右。
(2)瓊脂平板培養基保存法，保存多細胞真菌15 d。
(3)瓊脂斜面培養基保存法，保存單細胞、多細胞真菌1個月。
(4)液體石蠟覆蓋保存法，可保存真菌菌種6個月。
(5)液氮超低溫凍結保存法 可保存凍結菌種1年。
一般認為，傳代移種保存法保存的微生物菌種，易失去病原性，而超低溫保存法能夠完整的保存菌種的致病性。為此，我們針對實驗的初、中、末3個時期，對菌種的保存選擇不同的保存方法，優化了菌種的遺傳特性不變性。
anti-HAV 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體 規格： 48T/96T
EMA IgA 人抗肌內膜抗體IgA 規格： 48T/96T
TTN 人抗肌聯蛋白抗體 規格： 48T/96T
AAA 人抗肌動蛋白抗體 規格： 48T/96T
CCP 人抗環胍氨酸肽抗體 規格： 48T/96T
RSV 人抗呼吸道合胞病毒抗體 規格： 48T/96T
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