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1）微生物菌種 不同種類(lèi)的微生物對(duì)熱的敏感程度不同，如對(duì)熱zui敏感的梅毒螺旋體，在43℃10min就可殺死。同種微生物在不同生長(zhǎng)階段，對(duì)熱的抵抗力也有很大差異。一般來(lái)說(shuō)，老齡菌比幼齡菌的抗熱性強(qiáng)，孢子比營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞抗高溫，抗熱性zui強(qiáng)的是細(xì)菌的芽胞。此外，滅菌物品的含菌量越高，在同一溫度下滅菌所需的時(shí)間就越長(zhǎng)。如用麩皮、玉米粒等天然原料配制的培養(yǎng)基，因其含菌量比化學(xué)藥品高，滅菌時(shí)應(yīng)適當(dāng)加大壓力或延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。

 
2）溫度與作用時(shí)間 滅菌時(shí)間隨滅菌溫度的升高而縮短，兩者呈反比關(guān)系。微生物菌種測(cè)定高溫滅菌的效果常以致死溫度和致死時(shí)間為標(biāo)準(zhǔn)。致死溫度是指在一定時(shí)間內(nèi)，殺死一定數(shù)量的某種微生物所需的zui低溫度。在一定溫度下，殺死一定數(shù)量的某種微生物所需的zui短時(shí)間為致死時(shí)間。
 
3)介質(zhì)的性質(zhì) 介質(zhì)的性質(zhì)對(duì)高溫滅菌也有顯著影響。在一定范圍內(nèi)，培養(yǎng)基的水分越多，滅菌所需的溫度就越低。培養(yǎng)基中的糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、脂肪等介質(zhì)對(duì)微生物有保護(hù)作用，對(duì)其滅菌時(shí)必須提高溫度或延長(zhǎng)滅菌時(shí)間才可獲得可靠的滅菌效果。此外，培養(yǎng)基的pH對(duì)微生物的抗熱性也有較大影響。一般在pH7.0時(shí)，微生物菌種的抗熱性zui強(qiáng)，尤其在酸性條件下，會(huì)明顯減弱其抗熱性。