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（1）原理：細菌分解糖的能力與該菌是否含有分解某種糖的酶密切相關，故分解糖的能力各不相同，細菌分解糖類后的終產物亦不一致，在含糖培養基中加入指示劑，若細菌分解糖則產酸或產酸產氣，使培養基顏色改變，從而判斷細菌是否分解某種糖或其他碳水化合物。
（2）基本培養基：在培養基中加入0.5%-1%的糖類（單糖、雙糖、或者多糖）、醇類（甘露醇、肌醇）苷類（水楊苷、菊糖等）。培養基可為液體、半固體、固體或微量生化管幾種類型。
（3）實驗方法：取某一種細菌的24h純培養物分別接種到葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖等培養基內，37℃培養24h，觀察結果并記錄。
（4）結果判定
如果接種進去的細菌可發酵某種糖或醇，則可產酸，使培養基由紫色變成黃色，如果不發酵，則仍保持紫色。如發酵的同時又產生氣體，則在微量發酵管頂部積有氣泡。
（5）應用：是鑒定細菌zui主要zui基本的實驗，特別是對腸桿菌科細菌的鑒定尤為重要。