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培養(yǎng)基制備操作步驟
閱讀：569 發(fā)布時(shí)間：2017-3-28| 提 供 商 | 上海一研生物科技有限公司 | 資料大小 | 25KB |
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不同的培養(yǎng)基其制備方法也不同，一般包括以下步驟：
(一)準(zhǔn)確稱量試劑 根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值 將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾 將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝 將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100～150ml)，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌 培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。
高壓蒸汽滅菌，一般采用15磅/平方(即1.05kg/cm2)壓力，此時(shí)的溫度是121.3℃。滅菌20～30分鐘后，可達(dá)到*滅菌的目的。在進(jìn)行滅菌的時(shí)候，首先要把滅菌鍋內(nèi)的冷空氣排出，否則，冷空氣存在會(huì)降低鍋內(nèi)的實(shí)際溫度，影響滅菌效果。