大鼠胃黏膜上皮原代細胞

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠胃黏膜上皮細胞分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。幽門處的黏膜形成環形皺襞，突向腔內稱幽門瓣。胃黏膜可分為三層，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結締組織構成、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌、排列成內環外縱）。胃黏膜上皮細胞源自胃黏膜的上皮層，細胞為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和對胃黏膜的損害。體外培養胃黏膜上皮細胞為研究細胞功能及致病因子、藥物、激素對細胞的損傷、保護和功能調控提供了簡單而的模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胃黏膜上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胃黏膜上皮細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞)  人支氣管平滑肌細胞HBSMC  MRC-5(人胚肺成纖維細胞 )     HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 鴨原代胚胎成纖維細胞 狗原代皮下微血管內皮細胞

Des(Desmin 0.5mgDes(Desmin) 結蛋白抗原

ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白 (His 標簽)

TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 (His 標簽) Protein

TNFRSF21 Protein Mouse 重組小鼠 DR6 / TNFRSF21 蛋白 (His 標簽)

S100P重組人 S100P / S100E 蛋白 Protein

小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA 試劑盒

Rat adrenomedullin (ADM) ELISA Kit 大鼠腎上腺髓質素(ADM)試劑盒

HumanCalretinin,CRELISAKit 人鈣結合蛋白(CR)試劑盒 進口分裝

HumanCaveolin-1,Cav-1試劑盒人窖蛋白(Cav-1)試劑盒

轉基因油菜(canola)T45品系試劑盒20次

HumanSialicacid,SAELISAKit人唾液酸(SA)試劑盒

人足盂蛋白(PCX)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human PCX (Podocalyxin) ELISA Kit

人組織多肽抗原(TPA)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TPA (Tissue Polypeptide Aigen) ELISA Kit

人組織多肽特異性抗原(TPS)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TPS (Tissue Polypeptide Specific Aigen) ELISA Kit

人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit

大鼠胃黏膜上皮原代細胞豚鼠環0酸腺苷(cAMP)試劑盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit

Human azidothymidine (AZT) ELISA Kit 人(AZT)試劑盒

MonkeyapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 猴載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-4(Humanbasicfibroblastgrowthfactor4)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子4

細菌乳糖酵解溴百里酚藍(BTB)瓊脂平板50個

RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit兔子白介素1β(IL-1β)試劑盒規格：96T/48T

REN重組小鼠 REN1 / Renin-1 蛋白 (His 標簽) Protein

CD14(cluster of differentiation antigen 14 0.5mgCD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內毒素受體抗原

NAMPT重組人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

ACYP2 Protein Human 重組人 ACYP2 / Acylphosphatase-2 蛋白 (GST 標簽)

SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 標簽)