大鼠外周血來源內皮祖原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代；不建議多次傳代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠外周血來源內皮祖細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞，亦稱為成血管細胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞，缺乏成熟內皮細胞的特征性表型，不能形成管腔樣結構，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。研究顯示，內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠外周血來源內皮祖細胞采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠外周血來源內皮祖細胞經CD34免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

C2C12 小鼠成肌細胞  人間充質干細胞-肝 Human  PDE1C Others Human 人 PDE1C 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 羊卵巢顆粒細胞永生化細胞 人原代心肌細胞

Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原

ALDOB Protein Human 重組人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 標簽

TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白  Protein

NT5E Protein Mouse 重組小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標簽)

TXN重組人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein

小鼠白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒

People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脫氧尿三0酸(DP)試劑盒

HumanCalcitonin,CTELISAKit 人降鈣素(CT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancarcinoembryonicaign,CEA試劑盒人癌胚抗原(CEA/CD66)試劑盒規格：96T/48T

重組腺病毒效價比色法定量試劑盒50次

HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒規格：96T/48T

豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISAKit   ELISA.  

豬低分子肝素(LMWH)ELISAKit   ELISA.  

豬單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISAKit   ELISA.  

雙氫睪(DHT)ELISAKit   ELISA.

大鼠外周血來源內皮祖原代細胞豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 ，英文名： TNF-α ELISA Kit

Human protein kinase C (PKC) ELISA Kit 人蛋白激酶C(PKC)試劑盒

Monkeyα1-microglobulin,α1-MGELISAKitα1微球蛋白(α1-MG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBMP-6ELISAKit大鼠骨形成蛋白6

細菌鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次

Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規格：96T/48T

IL25重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽) Protein

衰變加速因子(DAF)重組蛋白 Recombinant Decay Accelerating Factor (DAF)

EIF5A重組人 EIF5A 蛋白 Protein

IL1RL1 Protein Human 重組人 IL1RL1 / ST2 蛋白

HA Protein H4N6 重組甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。