大鼠食管上皮原代細胞

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統發生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。在發育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變為復層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯合在一起產生有效滲透屏障，防止食管內容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內規律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠食管上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠食管上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

BRL細胞，肝細胞 人前列腺癌細胞,9L-E細胞 人上皮細胞RNAHMEpiC miRNA5 μg  YAC-1(小鼠淋巴瘤細胞)     RL95-2, 人子宮內膜腺癌細胞系 羊膜細胞,H.A.細胞 WERI-Rb-1(人視網膜母細胞瘤)  EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501 羊原代附睪上皮細胞 兔原代乳腺導管上皮細胞

FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結合蛋白抗原

CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白

CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein

小鼠骨膠原交聯(Cr)ELISA 試劑盒

Rat annexin V (ANX- V) ELISA Kit 大鼠膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒

Humansecretieceptor,SRELISAKit 人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒 進口分裝

Humanai-Reticulinaibody,ARA試劑盒人抗網硬蛋白抗體(ARA)試劑盒

植物細胞原生質體電轉試劑盒10次

HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKit人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒

小鼠性激素結合球蛋白(mouse SHBG)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠超氧化物歧化酶(mouse SOD)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠(mouse Somatostatin)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠受體亞型(mouse SS2)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

大鼠食管上皮原代細胞豚鼠鈣調素(CAM)試劑盒 ，英文名： CAM ELISA Kit

Human dopamine (DA) ELISA Kit 人多巴胺(DA)試劑盒

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBFELISAKit大鼠B因子

細菌鐵型亞鹽還原酶活性比色法定量試劑盒20次

rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒規格：96T/48T

CDH17重組大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 Protein

GLUT2(Glucose transporter type 2 0.5mgGLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉運蛋白2(抗原)

TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein

IL20 Protein Human 重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白

LGALS1 Protein Mouse 重組小鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白