大鼠脈絡膜微血管內皮原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠脈絡膜微血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠脈絡膜微血管內皮細胞采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠脈絡膜微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

AGS細胞，胃腺癌細胞 人喉癌細胞,TU 686細胞 大鼠垂體瘤細胞;MMQ  PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液   EPC, 大鼠血管內皮祖細胞 非洲綠猴腎，BS-C-1細胞 hFOB 豬小腸上皮細胞永生化細胞 人原代肝竇內皮細胞

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關因子2抗原

ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標簽)

BMP2重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標簽)

ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒

Rat alkaline phosphatase (ALP) ELISA Kit 大鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒

HumanFreeProteinS,FP-SELISAKit 人游離蛋白S(FP-S)試劑盒 進口分裝

Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRab試劑盒人乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒

正常人體腸組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit小鼠抗粒/中心體抗體(ACA)試劑盒

豬α葡萄糖苷酶（α-Glu）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬α干擾素(IFN-α)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬α干擾素(IFN-α)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬S-100B蛋白（S-100B）試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

大鼠脈絡膜微血管內皮原代細胞豬端粒酶(TE)ELISA 試劑盒

Human metallothionein (MT) ELISA Kit 人金屬硫蛋白(MT)試劑盒

PorcineBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 豬Bcl-2相關X蛋白(BAX)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha2-AP(MouseAlpha2-Aiplasmin)ELISAKit小鼠α2抗纖溶酶

血液(lithium)酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次

Nasoniaviipennisvitellogenin,VtgELISAKit蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(vtg)試劑盒

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein

reMOG 1-125 protein 重組髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白1-125 500ugreMOG 1-125 protein 重組髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白1-125

IL12A重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 標簽) Protein

ADPRH Protein Human 重組人 ADPRH / ARH1 蛋白 (His 標簽)

CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白