大鼠角膜內(nèi)皮原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代角膜內(nèi)皮細(xì)胞 BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞) Caco-2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 1ml/T75 FaDu 人咽鱗癌細(xì)胞 QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 Human 小鼠原代心臟纖維原細(xì)胞

大鼠角膜內(nèi)皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一，而角膜內(nèi)皮細(xì)胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細(xì)胞是角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞，構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障，通過(guò)離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分，維持角膜的半脫水狀態(tài)，保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細(xì)胞功能出現(xiàn)紊亂，常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有：①角膜是的無(wú)血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能；②角膜內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)角膜透明性有重要作用；③角膜內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度，防止水分滲入角膜內(nèi)，維持角膜實(shí)質(zhì)層相對(duì)脫水狀態(tài)，維持透明性。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)NSE（神經(jīng)元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細(xì)胞裂解液   少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物OGS  EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細(xì)胞裂解液   小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3); 豬原代骨骼肌成纖維細(xì)胞 小鼠原代膀胱上皮細(xì)胞

神經(jīng)顆粒素(NRGN)重組蛋白 Recombinant Neurogranin (NRGN)

IL3RA Protein Human 重組人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

FKBP1A重組人 FKBP12 蛋白 Protein

HA Protein Influenza 重組甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

LPAL2重組人 LPAL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA 試劑盒

Prothrombin fragme F1+2 (F1+2) ELISA Kit 人原片段F1+2(F1+2)試劑盒

HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG試劑盒人1,3-二0酸甘油酸(1,3-DPG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞線粒體粗提分離試劑盒10次

MouseAzidothymidine,AZTELISAKit小鼠(AZT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

瑞氏－姬姆薩復(fù)合染液   Vascular permeability test solion

姬姆薩染液   Peroxidase staining

巴氏染液（脫落細(xì)胞染色）   Name

快速H－E組織細(xì)胞及脫落細(xì)胞染液   Phosphate buffer

大鼠角膜內(nèi)皮原代細(xì)胞植物激素脫落酸(ABA)ELISA 試劑盒

Human ai RNP aibody (RNP-Ab) ELISA Kit 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)試劑盒

Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAFA(Humanai-filaggrinaibody)ELISAKit人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體

血液氧化型(GSSG)濃度比色法定量試劑盒50次

MousesubstancePreceptor,SP-RELISAKit小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)試劑盒

CD2重組大鼠 CD2 蛋白  Protein

Fut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1 0.5mgFut4/CD15/SSEA-1(Stage-specific embryonic surface antigen 1) 階段特異性胚胎表面抗原-1抗原

PARK7重組人 PARK7 / DJ-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白

ICAM2 Protein Mouse 重組小鼠 ICAM-2 / CD102 蛋白