大鼠鞏膜成纖維原代細胞

培養信息：

包被條件 貼壁不包被

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠鞏膜成纖維細胞分離自鞏膜組織，鞏膜是眼球壁的主要組成之一。是眼球纖維膜的后5/6部分。前方聯接角膜，后方與視神經的鞘膜延續。鞏膜在視神經穿出部附近最厚，愈前愈薄，在肌腱附著處又復增厚。其與角膜交界處，外面有環形的角膜溝，深部有鞏膜靜脈竇。小兒的鞏膜為淺藍色，成年為白色，老年因脂肪沉著而帶黃色。鞏膜結構堅韌，有支持和保護眼內組織的作用。成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠鞏膜成纖維細胞采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠鞏膜成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 Human  原代系膜細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml  人急性單核細胞白血病細胞;THP-1  人臍帶血單個核細胞 人肺成纖維細胞，Hs888Lu細胞 F9(畸胎瘤細胞) 豬原代腎上腺髓質細胞 兔原代胸腺基質細胞

LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體 0.5mgLOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體

AARSD1 Protein Human 重組人 AARSD1 蛋白 (His 標簽)

REG1B重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (His 標簽) Protein

KLK11 Protein Mouse 重組小鼠 KLK11 / Kallikrein-11 蛋白 (His 標簽)

KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒

Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒

HumanactivatedproteinC,APCELISAKit 人活化蛋白C(APC)試劑盒 進口分裝

Chickenniicoxide,NO試劑盒雞(NO)試劑盒

載玻片細胞P35蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒

小鼠脫酶(ID)試劑盒   96T/48T

小鼠褪黑素(MT/MLT)試劑盒   96T/48T

小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)試劑盒   96T/48T

小鼠透明質酸(HA)試劑盒   96T/48T

大鼠鞏膜成纖維原代細胞豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 試劑盒

Human macrophage colony stimulating factor receptor (M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)試劑盒

PorcinevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 豬血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha1-AT(HumanAlpha1-Aiypsin)ELISAKit人α1抗

血液0酸二酯酶1(PDE1)活性熒光定量試劑盒10次

Mouseβ-Defensins,β-DFELISAKit小鼠β-防御素(β-DF)試劑盒

IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。