大鼠肝內(nèi)膽管上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調(diào)控的分泌和吸收，在保持、調(diào)整和擴大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用，肝內(nèi)膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應(yīng)答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細胞約占肝細胞總數(shù)的5%，其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細胞具有復(fù)雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程，在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。研究表明，常見的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病，都是以肝內(nèi)膽管上皮細胞為病變靶位，進而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內(nèi)膽管上皮細胞的生物學(xué)特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中，通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

A-204細胞，人橫紋肌肉瘤細胞 兩歧雙歧桿菌 人肝永生化細胞;THLE-3  F81(貓細胞)     人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 Sars蛋白表達株，293001A細胞 NCI-H596 [H596](人肺癌細胞)  CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株) 豬原代腎小球系膜細胞 大鼠原代胎盤間充質(zhì)干細胞

PTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原

CECR1 Protein Human 重組人 CECR1 / ADA2 蛋白

NS2重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein

EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠仙臺病毒抗體(HVJ-Ab)試劑盒

Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒

Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)試劑盒 進口分裝

ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70試劑盒雞熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒

載玻片細胞CDK3蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒

魚類釋放激素試劑盒   魚類釋放激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚類釋放激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：魚類釋放激素試劑盒、魚類釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

魚類白介素1α試劑盒   魚類白介素1α試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚類白介素1α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：魚類白介素1α試劑盒、魚類白介素1αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

魚促上腺皮質(zhì)激素試劑盒   魚促上腺皮質(zhì)激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚促上腺皮質(zhì)激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：魚促上腺皮質(zhì)激素試劑盒、魚促上腺皮質(zhì)激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬甘油三酯試劑盒   豬甘油三酯試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬甘油三酯試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬甘油三酯試劑盒、豬甘油三酯eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

大鼠肝內(nèi)膽管上皮原代細胞小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human keratan sulfate (KS) ELISA Kit 人角質(zhì)素(KS)試劑盒

Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit 人非甲基化寡核苷酸(NON)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgA試劑盒雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞PARP蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯(lián)血藍蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。