詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
[Pyr1]-Apelin-13 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
[Pyr1]-Apelin-13是一種高效的,選擇性的內源性apelin受體激動劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:217082-60-5 別名:XRPRLSHKGPMPF;[pGlu1]-Apelin-13 純度:98.23% 分子量:1532.81 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
白頭翁皂苷E英文名稱: Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-1英文名稱: Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗體包裝1g
白頭翁皂苷E-2英文名稱: Strontium fluoride哺乳動物室管膜相關蛋白1抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-3英文名稱: Syringaldehyde內皮粘附分子抗體包裝10g
白土苓(短柱肖菝契)(標準品)英文名稱: Tetrazolium violet上皮有絲分裂蛋白抗體包裝50g
白土苓(華南肖菝葜)(標準品)英文名稱: 2-MethylindoleEmerin蛋白抗體包裝25g
白薇(標準品)英文名稱: Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信號調節激5抗體包裝5g
白鮮堿(標準品)英文名稱: AMP buffer concentrate磷/磷二酯家族成員5抗體包裝1g
白鮮皮(標準品)英文名稱: Benzimidazole早期生長反應蛋白2抗體包裝25g
白楊(標準品)英文名稱: Carboxypeptidase B磷化雌激受體β抗體包裝5g
白楊-7-O-龍膽二糖苷英文名稱: Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激β抗體包裝1g
白英(標準品)英文名稱: dTDP微管相關末端結合蛋白2抗體包裝5g
白芷(標準品)英文名稱: Galactose oxidase減數分裂內切EME1抗體包裝1g
百部(對葉百部)(標準品)英文名稱: Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突觸蛋白2抗體包裝25g
百部(直立百部)(標準品)英文名稱: Lead (II) chloride延伸突觸蛋白1抗體包裝5g
: =DSM40044=ATCC23908=CBS804.68=IFO12862=ISP資源名稱: 脆弱鏈霉菌 質量規格:>98%,BR通道蛋白4抗體試劑盒人參皂3;Ginsenoside
出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 質量規格:HPLC≥98%,標準品通道蛋白3試劑盒人參皂苷RD;Ginsenoside R
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BR痘帶狀皰疹病IgM試劑盒人參皂苷RC;Ginsenoside R
apelin受體激動劑([Pyr1]-Apelin-13)信號轉導蛋白亞7A抗體Ⅱ(F2)檢測試劑盒F2 ELISA Kit
凋亡抑制因子抗體凝血/抗凝血復合體(TAT)檢測試劑盒TAT ELISA Kit
D型產氣莢膜梭菌抗體凝溶膠蛋白(GS)檢測試劑盒GS ELISA Kit
降鈣抗體凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)檢測試劑盒LOX1 ELISA Kit
20號染色體開放閱讀框14抗體鎳紋蛋白(METRN)檢測試劑盒METRN ELISA Kit
結締組織生長因子抗體尿調蛋白(UMOD)檢測試劑盒UMOD ELISA Kit
性T抗原-4抗體尿皮質3(UCN3)檢測試劑盒UCN3 ELISA Kit
降鈣受體抗體尿皮質2(UCN2)檢測試劑盒UCN2 ELISA Kit
1號染色體開放閱讀框38抗體尿皮質1(UCN1)檢測試劑盒UCN1 ELISA Kit