詳細介紹
商品介紹:
長鏈二烷基羰花青化合物,特別是Dil(分子量933.88),廣泛應用于固定和非固定的組織與細胞中,進行順行或逆行的神經示蹤分析。 Dil 不會影響細胞的活力、生長以及基本生理特性。Dil 標記運動神經元,可在培養基條件下持續跟蹤長達四周,在體內長達一年。染料通過在質膜中的緩慢橫向擴散均勻標記神經元,0.2~0.6mm/每天/固定標本,在活體組織里,可以達到6mm/每天。經過醛固定的組織,Dil 的擴增可以持續長達1~2 年。一般情況下未標記的染料不會向非標記的細胞轉移,除非質膜被破壞,比如切片部位。 儲存:-20℃,避光,有效期12個月。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
DiI | 10mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
茶黃-3'-沒食子酯英文名稱: Potassium pyrophosphate, tetrabasic叉頭蛋白G1抗體包裝250mg
茶黃-3-沒食子酯英文名稱: Potassium tungstate, dehydrate腫瘤/抗原112抗體包裝100ml
茶堿(標準品)英文名稱: Quinine hemisulfate salt hydrate微管動力調節蛋白FAM82A抗體包裝25ml
柴胡(北柴胡)(標準品)英文名稱: Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrateFAM50B蛋白抗體包裝500ml
柴胡皂苷A(標準品)英文名稱: Sodium phosphotungstate, hydrate形成2抗體(成蛋白)包裝100g
柴胡皂苷B1(標準品)英文名稱: Sodium stearate脂閥結構蛋白1抗體包裝25g
柴胡皂苷B2(標準品)英文名稱: Sodium thiosulfate anhydrous成纖維生長因子17抗體包裝1g
柴胡皂苷B3(標準品)英文名稱: Sulfo NHS LC Biotin成纖維生長因子23抗體包裝5g
柴胡皂苷B4英文名稱: Sulfo NHS SS Biotin成纖維生長因子20抗體包裝1g
柴胡皂苷C(標準品)英文名稱: Tetraacetylribose成纖維生長因子19抗體包裝5g
柴胡皂苷D(標準品)英文名稱: Tyrosine decarboxylase成纖維生長因子22抗體包裝25g
柴胡皂苷F(標準品)英文名稱: Victoria blue R胎球蛋白A包裝5g
柴胡皂苷G(標準品)英文名稱: α-Ketoglutaric acid potassium salt叉頭蛋白L2抗體包裝25g
柴胡皂苷H(標準品)英文名稱: 1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide叉頭相關轉錄因子3抗體包裝5g
柴胡皂苷I英文名稱: 1,2-Ethanedithiol鐵蛋白抗體包裝1g
深黃被孢霉Mortierella│isabellina 質量規格:≥60U/mg,USP,BR,可用于培養生長激釋放多肽試劑盒7-羥基千金子二萜;7β-Hydrox
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質量規格:>98%,BR生長激結合蛋白試劑盒芹糖異甘草苷;Isoliquiritin
華癸中間根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 質量規格:含量測定生長激試劑盒5-羥色;Serotonin hydr
細胞膜橙紅色熒光探針(DiI)木樨草青霉 2-溴-3-氟-4-甲基吡啶胰島樣生長因子結合蛋白5Elisa
果生鏈核盤 氯乙縮乙二Elisa
蟲花棒束孢 2-乙基-3-甲氧基吡CD39分子Elisa
大豆慢生根瘤 2-萘酸頻哪酯聚(ADP核糖)聚合1Elisa
白色念珠-質控 6-硝基喹喔啉-2-酮S100-β蛋白Elisa
羅氏鏈霉 丁基萘磺酸鈉磷酸化TAR DNA結合蛋白43Elisa
Bacillus anthracis 六溴環十二烷多配體蛋白聚糖1Elisa
枯草芽孢桿 4,4,4-三氟巴豆酸乙酯酪氨酸激1Elisa
短桿屬 甲基六氫苯酐Toll樣受體5Elisa
球孢白僵 L-天冬酰叔丁酯鞭毛蛋白Elisa
淡天藍鏈霉 1-Boc-3-氮雜環丁烷酮酸激Elisa
異常畢赤酵母 2-氯-3-溴-5-氟吡啶CD247分子Elisa
大豆慢生根瘤 N-甲基正戊血小板P2Y12受體Elisa
溶桿 2,4-二甲基-5-基-1H-吡咯-3-羧酸b型鏈球抗m蛋白抗體Elisa
龜裂鏈霉 2-己基癸酸糖原合成激3Elisa